产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > PCR试剂盒 > 荧光-PCR法 > 48T埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒规格
埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒规格

埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒规格

产品简介:埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒规格
上海联祖生物相关产品:
杨酸(标准品)(R)-2,5-二氢-3,6-二甲氧基-2-异基吡

α-甲基吡啶(标准品)2-肼基

盐酸帕他莫2-甲氧基

盐酸帕他莫(标准品)二甲

盐酸萘甲唑啉(标准品)

产品型号:48T

浏览次数:290

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌


注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒规格

 规格

 48T

 货号

 LZP8120

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
酚酞(标准品)甲酸酯

香草(熔点标准品)三氟化

酰(标准品)1,二溴烷

环吡酮;环匹罗司溴丁烷

环吡酮;环匹罗司(标准品)正戊烷

磺(标准品)1-丁烷

磺二甲嘧啶1-溴-烷

磺二甲嘧啶 (标准品)正丁

双(标准品)丁

糖精(标准品)1,二

酚酞(标准品)二

氨基己酸(标准品)N-甲基-2-羟基

水杨酸(标准品)(R)-2,5-二氢-3,6-二甲氧基-2-异基吡

α-甲基吡啶(标准品)2-肼基

盐酸帕他莫2-甲氧基

盐酸帕他莫(标准品)二甲

盐酸萘甲唑啉(标准品)二

壬(标准品)异酸酯

α增强子结合蛋白1Phospho-Cyclin B1 (Ser147) /FITC  荧光素标记兔抗、大、周期素B1IgG100 ul

脊髓小脑共济失调10Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC  荧光素标记兔抗、大、周期素B1IgG100 ul

蛋白激酶A锚定蛋白7Cyclin C/FITC  荧光素标记周期素CIgG100 ul

腺苷三酸结合盒转运体12Cyclin D1/FITC  荧光素标记周期素D1蛋白100 ul

腺苷三酸结合盒转运体9Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC  荧光素标记兔抗、大、cyclin D1IgG100 ul

三酸腺苷结合盒转运蛋白4Cyclin D2/FITC  荧光素标记周期素D2IgG100 ul

肌动蛋白结合蛋白LIM3Cyclin D3/FITC  荧光素标记周期素D3IgG20 ul

高尔基复合体相关蛋白1Cyclin E/FITC  荧光素标记周期素E/原癌基因IgG100 ul

酰辅酶A羧化酶1ACCαphospho-Cyclin E(Thr62) /FITC  荧光素标记兔抗、大、周期素EIgG100 ul
埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒规格HAUS5蛋白抗体Sugiol中文名:柳杉酚别名:分子式:C20H28O2

HMG盒区内含蛋白1抗体14-Deoxycoleon U中文名:14-去氧鞘蕊酮U别名:6-Hydroxysalvilone分子式:C20H26O4

血红蛋白theta亚型1抗体Tetrachyrin中文名:别名:Zoapatlin分子式:C20H28O2

hbs1样蛋白抗体ent-3β-Angeloyloxykaur-16-en-19-oic acid中文名:别名:分子式:C25H36O4

缩素复合物亚型蛋白3抗体Andropaside中文名:别名:14-Deoxyandrographoside分子式:C26H40O9

 



留言询价

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

上海联祖生物科技有限公司 公司地址:上海松江区莘砖公路518号5号楼601室   技术支持:环保在线
  • 电话:021-61210612
  • QQ:3191886983
  • 手机:13482402338 微信同号
  • 邮箱:3191886983@sdkjfhkjsdhfqq.com

扫一扫 更多精彩

微信二维码

联系我们

contact us

扫一扫,关注我们

返回顶部