荧光-PCR法相比普通PCR模式的优势

更新时间：2023-01-05

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　　近年来，荧光-PCR法技术有了重大改进。将传统PCR检测模式中的PCR扩增和检测相结合（即在同一个密闭容器中将PCR扩增反应与荧光标记探针检测结合在一起）检测目的核酸的检验方法纷纷出台。这样的检测方法称为“实时”PCR，表示PCR扩增产物可被实时检测。准确地说，“实时”是指在每一个PCR循环后检测扩增产物，当PCR扩增反应结束后，我们可得到每个样品的PCR扩增产物变化曲线。通过分析这些反应曲线，不但可得到病原体的定性检测结果，还可对病原体的数量进行精确定量。

　　实时荧光-PCR法不仅具有普通PCR的高灵敏性，而且由于应用了荧光探针，可通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果，所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术的高准确性，克服了常规PCR的许多缺点。

　　荧光-PCR法相比较普通PCR模式的优势：

　　1.由于实时荧光PCR采用封闭的检测模式，因此扩增产物导致污染的可能性比普通PCR要小得多。

　　2.由于扩增产物的检测在PCR扩增过程中同时进行，并且数据的采集、分析全部由仪器自动完成，因此整个检测所需的时间比普通PCR要节省许多。

　　3.实时荧光PCR检测模式功能强大，具备定性、定量、突变、多项目等检测功能。而普通PCR要完成上述项目需采用不同的技术平台。

　　4.实时荧光PCR进行定量检测时，其定量线性范围（5-6 logs）比普通PCR（2-3 logs）要宽得多。