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荧光-PCR法相比普通PCR模式的优势

更新时间:2023-01-05点击次数:619
   近年来,荧光-PCR法技术有了重大改进。将传统PCR检测模式中的PCR扩增和检测相结合(即在同一个密闭容器中将PCR扩增反应与荧光标记探针检测结合在一起)检测目的核酸的检验方法纷纷出台。这样的检测方法称为“实时”PCR,表示PCR扩增产物可被实时检测。准确地说,“实时”是指在每一个PCR循环后检测扩增产物,当PCR扩增反应结束后,我们可得到每个样品的PCR扩增产物变化曲线。通过分析这些反应曲线,不但可得到病原体的定性检测结果,还可对病原体的数量进行精确定量。
  实时荧光-PCR法不仅具有普通PCR的高灵敏性,而且由于应用了荧光探针,可通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果,所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术的高准确性,克服了常规PCR的许多缺点。
  荧光-PCR法相比较普通PCR模式的优势:
  1.由于实时荧光PCR采用封闭的检测模式,因此扩增产物导致污染的可能性比普通PCR要小得多。
  2.由于扩增产物的检测在PCR扩增过程中同时进行,并且数据的采集、分析全部由仪器自动完成,因此整个检测所需的时间比普通PCR要节省许多。
  3.实时荧光PCR检测模式功能强大,具备定性、定量、突变、多项目等检测功能。而普通PCR要完成上述项目需采用不同的技术平台。
  4.实时荧光PCR进行定量检测时,其定量线性范围(5-6 logs)比普通PCR(2-3 logs)要宽得多。

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