马传染性贫血（EIAV）核酸试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
氨芬酸钠(标准品)HER4/ErbB4 (111B2) Rabbit mAb2-氟-6-甲氧基

地塞米松环氧水解物HER4/ErbB4 (111B2) Rabbit mAbN-基马来酰亚

2,6-二叔丁基对甲酚,丁基羟, 抗氧剂 BHT Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb硝酸钆

甲基泼尼松Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb甲基酸频哪酯

甲基泼尼松(标准品)TNFRSF17/BCMA Antibody对叔丁基酮

阿普斯特;CC10004RalA (D6G8) Rabbit mAbS-基丁氨酸

L-(-)-葡萄糖(标准品)RIP3 (D4G2A) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-溴-5-氟甲

7-酮基去氢表雄酮SMC1 Antibody2-氟-甲氧基

硝酸铷Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)邻三氟甲氧基甲

CHIR-99021 (CT99021.HCl)SQSTM1/p62-like Receptor Antibody Sampler Kit邻氨基

-3,5-二甲酚,对间二甲酚DCBLD2 AntibodyFmoc-2-氨基异丁酸

骆驼蓬;骆驼蓬灵;哈梅灵(标准品)Phospho-SMC1 (Ser957) (5D11G5) Mouse mAb2-基吲哚

阿卡地新(AICAR)Phospho-NF-κB p105 (Ser933) (18E6) Rabbit mAb吉西他滨

蒲公英萜；蒲公英赛(标准品)Stat5a (4H1) Mouse mAb并噻吩

琥珀酸普卡必利Phospho-NF-κB p105 (Ser933) (178F3) Rabbit mAb (IHC Specific)5-硝基

盐酸纳洛酮Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody3,4,5-*氧基

硝酸布康唑Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody[1,1'-双(二基膦)二茂铁]二化钯二络合物

NVP-BKM120Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) Antibody2-氟甲

鸭抗凝血素(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC  荧光素标记兔抗、大、ATRIgG20 ul

鸭极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒ATF2/FITC  荧光素标记活化复制因子2IgG100 ul

鸭环酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC  荧光素标记兔抗、大、、猴酸化活化复制因子2(phospho ATF 2)IgG100 ul

鸭环酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒ATF3/FITC  荧光素标记活化转录因子3IgG100 ul

鸭白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒ATF4/FITC  荧光素标记活化转录因子4IgG100 ul

鸭白介素6(IL-6)ELISA试剂盒ATF6/FITC  荧光素标记活化转录因子6IgG100 ul

鸭白介素4(IL-4)ELISA试剂盒ATG1/ULK1/FITC  荧光素标记自噬相关蛋白1IgG20 ul

鸭白介素2(IL-2)ELISA试剂盒ATG7/FITC  荧光素标记自噬相关蛋白7IgG100 ul

鸭白介素1(IL-1)ELISA试剂盒thrombin II /FITC  荧光素标记凝血酶ⅡIgG100 ul
马传染性贫血（EIAV）核酸试剂盒规格甲状腺激素受体共激活蛋白抗体8-Prenyldaidzein中文名：8-异戊烯基大豆苷元别名：分子式：C20H18O4

碱性核蛋白1/锌指蛋白basonuclin抗体Barpisoflavone A中文名：别名：2'-Hydroxyisoprunetin分子式：C16H12O6

癌膜蛋白11抗体（前梯度同源蛋白2）Erythrinin G中文名：别名：分子式：C20H18O6

酪氨酸蛋白激酶6/肿瘤激酶抗体Isolicoflavol中文名：异甘草黄酮醇别名：分子式：C20H18O6

骨碱性磷酸酶抗体Demethylvestitol中文名：别名：分子式：C15H14O4