猪流感（SIV）核酸试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
盐酸马尼地平Rab10 Antibody2-酰

盐酸马尼地平(标准品)PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAbD-溴氨酸

二氢睾酮,雄诺龙FXR1 (L662) Antibody甲巯脯酸

多拉菌素STOP (175) Mouse mAb2,二甲基吡咯

3,3,5-三-L-甲状腺原氨酸，塞罗宁SOD1 (71G8) Mouse mAb甲氧基苄硫

Corylifol A(标准品)SOD1 (71G8) Mouse mAb2,5-二甲基呋喃

溴芬酸钠EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb氟

溴芬酸钠(标准品)EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb间

盐酸氟哌噻吨EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb间二甲

茶多酚;绿茶提取物Fer (5D2) Mouse mAb1,3,5-三溴

四氢姜黄素 Ron (1B5) Mouse mAb2,二羟基-6-甲基嘧啶

管花苷A(标准品)Non-phospho (Active) β-Canin (Ser33/37/Thr41) Antibody甲基哌啶

2’-酰基毛蕊花糖苷(标准品)THEM2 AntibodyN-甲基哌啶

2-[2-(2,2,2-三氟氧基)氧基]基溴 WASP (D9C8) Rabbit mAbL-高胱氨酸

吡咯喹啉醌;维生素tochrome c Antibody己二酸单酯

吡咯喹啉醌二钠盐;维生素盐Cytochrome c Antibody1-(基)哌

盐酸右美托咪定CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb (PE Conjuga)甲酸酯

地夫可特ATP2A1/SERCA1 (A988) Antibody溴-1-

白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒VTG  鱼、青鳉鱼卵黄蛋白原300 ul

白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒VWF  血管假性血友病因子/血管性血友病因子100 ul

白介素15(IL-15)ELISA试剂盒V.cholera Ogawa  01群稻叶型霍乱弧菌300 ul

β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒V.cholera Ogawa  01群小川型霍乱弧菌100 ul

α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒WEE1 proin  WEE1蛋白300 ul

Tau蛋白ELISA试剂盒Phospho-Wee1 (Ser642)  酸化WEE1蛋白100 ul

N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒WNK1  赖氨酸缺陷型蛋白激酶1100 ul

猴肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒Phospho-WNK1 (Thr60)  赖氨酸缺陷型蛋白激酶1300 ul

猴脂联素(ADP)ELISA试剂盒WNK4  WNK4100 ul
猪流感(SIV)核酸试剂盒规格长链脂肪酸延长酶长ELOVL6抗体2,6-Bis(hydroxymethyl)-p-cresol中文名：2,6-双(羟甲基)对甲酚别名：分子式：C9H12O3

酪氨酸蛋白激酶受体A6抗体3,9-Bis(2-cyaethyl)-2,4,8,10-tetraoxaspiro[5.5]undecane中文名：3,9-双(3-氰乙基)-2,4,8,10-四氧杂螺[5.5]十一烷别名：CTU分子式：C13H18N2O4

酪氨酸蛋白激酶受体A3抗体2,2'-Dithiobisbenzanilide中文名：2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫别名：分子式：C26H20N2O2S2

酪氨酸蛋白激酶受体A7抗体Dimethylolurea中文名：双羟甲脲别名：分子式：C3H8N2O3

酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene中文名：4,4'-双(2-苯并恶唑基)芪别名：荧光增白剂 OB-1分子式：C28H18N2O2
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。