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H辅酶ⅠNAD测试剂盒可见分光光度法

H辅酶ⅠNAD测试剂盒可见分光光度法

产品简介:H辅酶ⅠNAD测试剂盒可见分光光度法公司*的商品:CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)重组蛋白Recombinant CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha (CEBPa)CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)重组蛋白Recombinant CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)CD200受体

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更新时间:2022-05-19

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌货号LZ-01322S

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产品名称:H辅酶ⅠNAD测试剂盒可见分光光度法
产品规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:LZ-01322S

产品分类:辅酶Ⅰ系列
商品介绍:

测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
QQ截图20220307153443.png

特点为:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速。

Apelin     脂肪炎症因子Apelin抗体    

ATP4B     氢钾ATP酶通道蛋白抗体    

ATP5A     ATP5A抗体    

Arg3.1     即刻早期基因ARC抗体    

ARF6     ADP核糖基化因子6抗体    

Aromatase     芳香化酶抗体    

Artemin     Artemin抗体    

ADRA1A     alpha 1肾上腺素能受体A抗体    

Angiotensin II Type 1 Receptor     血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体    

ATF3     活化转录因子3抗体    

APJ Receptor     血管紧缩素样蛋白1抗体    

APG7     自噬相关蛋白7抗体    

ANTXR2     炭疽毒素受体2抗体    

ATG4C     自噬相关蛋白4C抗体    

APG5L     自噬蛋白5/细胞凋亡的特异性蛋白抗体    

ARSA     芳基硫酸酯酶A抗体    

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操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。



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