H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

商品介绍：

测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
 

常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议 500万细菌或细胞加入 1mL提取液） ，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声 3s，间隔10s，重复30 次）8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

脑型肌酸激酶(CKB)天然蛋白    Native Creatine Kinase, Brain (CKB)     

糖化血红蛋白A1c(HbA1c)天然蛋白     Native Glycated Hemoglobin A1c (HbA1c)     

血红蛋白(HB)天然蛋白     Native Hemoglobin (HB)      

免疫球蛋白G1(IgG1)天然蛋白     Native Immunoglobulin G1 (IgG1)     

免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白     Native Immunoglobulin G (IgG)     

免疫球蛋白G1(IgG1)天然蛋白     Native Immunoglobulin G1 (IgG1)     

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白     Native Ischemia Modified Albumin (IMA)     

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白     Native Ischemia Modified Albumin (IMA)     

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白     Native Carbonic Anhydrase II (CA2)     

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白     Native Carbonic Anhydrase II (CA2)     

癌胚抗原相关细胞粘附分子1(CEACAM1)天然蛋白     Native Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 1 (CEACAM1)     

肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白     Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)     

肌红蛋白(MYO)天然蛋白     Native Myoglobin (MYO)     

转铁蛋白受体(TFR)天然蛋白     Native Transferrin Receptor (TFR)     

107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重组蛋白    Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)    

10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)重组蛋白    Recombinant Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)    

188kDa核孔蛋白(NUP188)重组蛋白    Recombinant Nucleoporin 188kDa (NUP188)    

1号染色体开放阅读框85(C1orf85)重组蛋白    Recombinant Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85)    

35kDa核孔蛋白(NUP35)重组蛋白    Recombinant Nucleoporin 35kDa (NUP35)    

ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白    Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)    

70kDa热休克蛋白1样蛋白(HSPA1L)重组蛋白    Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)    

Adropin蛋白(AD)重组蛋白    Recombinant Adropin (AD)    

ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)重组蛋白    Recombinant ATP Binding Cassette Transporter G1 (ABCG1)    

beta Amyloid 31-35    β淀粉样肽（31-35)/Aβ 31-35 抗体    

beta-Amyloid 1-40(CT)    β淀粉样肽 1-40（C端）抗体    

Beta arrestin 2    β-抑制蛋白2抗体/β休止蛋白2/β-arrestin抗体    

Anthrax    炭疽杆菌抗体    

ACD    肾上腺皮质发育异常蛋白抗体    

Angiotensin II type 1A receptor    血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体    

ABI1    ABI1/SSH3BP1蛋白抗体    

Acetyl-Histone H1.4 (K53)    乙酰化组蛋白H1b抗体    

phospho-Androgen Receptor (Ser578)    磷酸化雄激素受体抗体    

APE1    多功能DNA修复酶抗体    

AAK1    AP2关联激酶1抗体    

AQP1    水通道蛋白1抗体    

AATK    AATK细胞凋亡关联酶抗体    

H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法ABCB5    ATP结合蛋白家族5抗体    

APNG    N-甲基嘌呤DNA糖基化酶    

AU5 tag    AU5 tag标签抗体    

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。