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DEFA3中性粒细胞防御素3ELISA试剂盒

DEFA3中性粒细胞防御素3ELISA试剂盒

产品简介:DEFA3中性粒细胞防御素3ELISA试剂盒公司正在销售的产品:IL-28A/IFNL2/FITC 荧光标记白介28A抗体IgG化 CP,98.5%
IL-28B/IL-28C/FITC 荧光标记白介28B抗体IgG化 GR,99.8%
IL-29/IFNL1/FITC 荧光标记白介29抗体IgG化 PT
IL-31/FITC 荧光标记白介31抗体IgG化 SP
IL-31RA/CRL3/

产品型号:48T/96T

浏览次数:82

更新时间:2022-05-26

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌货号LZ-E028595

标本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

产品属性:

产品名称

DEFA3中性粒细胞防御素3ELISA试剂盒

英文名称

DEFA3 ELISA Kit

产品规格

48T/96T

产品货号

LZ-E028595

需要而未提供的试剂和器材:

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器

6. 蒸馏水,容量瓶等。

备试剂与收集血样:

1.  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。

2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4.  洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)


QQ截图20200429162339.jpg

检测程序:

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备:

ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1)血清

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4)细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5)培养细胞

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6)组织标本

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

操作步骤:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

糖皮质激素受体β(GR-β)试剂盒细叶远志皂无水碳钠 AR4-(5-乙-1,2,4-噁二唑-3-)苯 97%

糖皮质激素受体β(GR-β)试剂盒夏佛塔丁二钠 AR,99.0%硫代乙乙酯 98%

糖皮质激素受体α(GR-α)试剂盒仙鹤草酚B亚硝铁化钠 99.98% metals basis3-氟-4-酚 99%

糖皮质激素受体α(GR-α)试剂盒仙鹤草酚D亚磷三苯酯 CP,97%对氟苯乙酯 99%

高敏三状腺原氨(u-T3)试剂盒仙茅亚磷三苯酯 98%3-氟苄 97%

高敏三状腺原氨(u-T3)试剂盒纤精四氢糠 AR,98.0%8-氟-4-羟-2-三氟喹啉 97%

黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒纤细四氢糠 CP对氟苯酯 97%

黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒莶精四氢糠 99%6-羟-2-吡啶羧 97%

8异前列腺素(8-iso-PG)试剂盒腺四 ARN-(2-羟乙)哌 98%

8异前列腺素(8-iso-PG)试剂盒腺嘌呤苯二异酯 98%(剧品)2-羟苯 97%

(Renin)试剂盒 相思豆素苯二异酯 Standard for GC(剧品)2-羟 99%

(Renin)试剂盒 相思子苯硫酚 99%(剧品)2- 95%

上腺素(EPI)试剂盒香草四 离子对色谱级,≥99.0% (AT)(R)-(-)-5-羟-2-吡咯烷 99%

上腺素(EPI)试剂盒香草四 ACS, ≥98.0%(S)-(+)-5-羟-2-吡咯烷 98%

雌二受体(ER)试剂盒香草乙乙烷 99%,含铜屑稳定剂(S)-1-Boc-3-羟吡咯烷 98%

雌二受体(ER)试剂盒三 AR,99.5%2-羟-4-三氟嘧啶 97%
DEFA3中性粒细胞防御素3ELISA试剂盒本试剂盒是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。

试剂盒组份:

β-半乳糖酶染色固定液—————100ml

X-Gal溶液————————————5ml

β-半乳糖酶染色液A——————1ml

β-半乳糖酶染色液B——————1ml

β-半乳糖酶染色液C——————100ml

绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老(senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞细胞通常体积变大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖酶。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

本细胞衰老β-半乳糖酶染色试剂盒,以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖酶催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖酶的细胞或组织。





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