ATF-1转录因子抗体-1ELISA试剂盒

服务：

公司产品仅用于科研我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

样品准备：

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

使用方法：

测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)试剂盒谷氨单钠盐蓝VF IndicatorCelite® 硅藻土545  助滤剂，碳钠处理，通量煅烧

粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)试剂盒骨化二乙苯酯 99%Celite 硅藻土，洗 用于总膳食纤维含量分析, TDF-100A

肠三叶因子(ITF)试剂盒骨化二扑草净 分析标准品，99%助滤剂，洗，碳钠处理，通量煅烧

肠三叶因子(ITF)试剂盒瓜子金皂苷V扑草净标准溶液 10μg/ml,u=6% 助滤剂，通量煅烧（filter aid, flux calcined）

Dickkopf 1(DKK1)试剂盒瓜子金皂苷己扑草净标准溶液 100μg/ml,u=4%1-癸烯 95%

Dickkopf 1(DKK1)试剂盒关附素扑草净 分析标准品，99.5%二正辛 97%

激肽释放11(KLK 11)试剂盒 管花苷A聚乙二二烯酯 平均分子量 ~258 1-己烯 99%

激肽释放11(KLK 11)试剂盒 光翠雀聚乙二二烯酯 平均分子量~5751-己烯 分析标准品，≥99.5% (GC)

生长调节致癌因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)试剂盒 光萼野百合聚乙二二烯酯 平均分子量 ~700 1-己烯 97%

生长调节致癌因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)试剂盒 光甘草定聚乙二烯酯 平均分子量 ~3001-己烯 Standard for GC

生长调节致癌因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)试剂盒 广防风苷A聚乙二烯酯 平均分子量 ~475α-乙烯 99%

生长调节致癌因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)试剂盒 广藿香聚乙二烯酯 平均分子量~9501-辛烯 98%

美丽线虫凋亡因(CED-3)试剂盒 鬼臼素Mw 400,000-500,000 ,20 wt. %水溶液，800-1000 cP (25 °C) 2,4,4-三-1-戊烯 98%

美丽线虫凋亡因(CED-3)试剂盒 鬼臼素-4-O-葡萄糖苷盐巴马汀 97% 2,3-二-1,4-萘醌 98%

胸腺白血病抗原(TLa)试剂盒 哈巴俄苷N-苯-1-萘 98%2,3-二-1,4-萘醌 分析标准品

胸腺白血病抗原(TLa)试剂盒 哈巴苷异硫苯酯 99%, 蛋白测序级对氨苯 98%
ATF-1转录因子抗体-1ELISA试剂盒PKH67/PI 双染细胞毒性检测试剂盒是利用细胞荧光染料PKH67和PI对细胞进行染色，利用PKH67标记靶细胞，PI标记死的靶细胞来区分不同的细胞，活的靶细胞成绿色，死的靶细胞成红色和绿色，从而检测细胞毒性作用。

根据不同的实验方案设计，可以用来检测化合物的细胞毒性作用。也可以用来检测杀伤性T 细胞或NK 细胞介导的细胞毒作用。

荧光染料PKH67是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。对细胞毒性较小，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH67标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。

在细胞分裂增殖过程中，PKH67的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH67标记细胞的荧光非常均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次(1/2的荧光强度)，二次(1/4的荧光强度)，三次(1/8的荧光强度)，以及更多分裂次数的细胞。PKH67可检测分裂次数多达六次甚至更多。

除了用于细胞增殖检测，PKH67 还可以用于细胞的体外盒体内示踪，标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。

PKH67标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH67 毒性较小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。

PKH67/PI标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞毒性检测。

PKH67标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=490 nm,λem=502 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为502nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。PI标记细胞呈红色荧光，流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为647nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL2 detection channel。

PKH67标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞毒性外，还可单染后用于细胞增殖检测，或者用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。

储存条件：-20℃避光保存。

注意事项:

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。