CSPP1中心体纺锤体极相关蛋白1ELISA试剂盒公司正在销售的产品:Inhibin Beta C /FITC 荧光标记抑制βC抗体IgGD-木糖 超纯级, ≥99%Inhibin Alpha/Biotin 生物化抑制α抗体IgGβ-烟酰腺二核 95%Insulin/FITC 荧光标记标记胰岛抗体IgG叔丁氧羰肼 98%Insulin/FITC 荧光标记胰岛抗体IgG肟 99%In
产品分类
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1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
产品属性:
产品名称 | CSPP1中心体纺锤体极相关蛋白1ELISA试剂盒 |
英文名称 | CSPP1 ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E028597 |
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
5羟色(5-HT)试剂盒小豆蔻明硫代硫铵 99%7-吲哚 98%
5羟色(5-HT)试剂盒小芸木素硫代硫铵 98%4-吲哚 98%
抑制素A(INH-A)试剂盒缬草3-酚 98%N-间苯 97%
抑制素A(INH-A)试剂盒缬草三酯3-酚 分析标准品1-吡唑 98%
性激素结合球蛋白(SHBG)试剂盒性铬蓝K AR(S)-(+)-扁桃酯 98%
性激素结合球蛋白(SHBG)试剂盒辛弗林偶氮荧光桃红 Biological stain(R)-(-)-扁桃酯 98%
脱氢表雄S7(DHEA-S7)试剂盒辛弗林盐盐偶氮荧光桃红 Dye content 90 %2-烯 ≥99.5%
脱氢表雄S7(DHEA-S7)试剂盒辛辣内酯A盐氨脲 99%5-酰水杨酯 98%
脱氢表雄(DHEA)试剂盒辛夷脂素盐氨脲 分析标准品,99.95%2- 98%
脱氢表雄(DHEA)试剂盒新补骨脂异黄1-氨-2-萘酚-4-磺 97%5-硝吲哚 98%
降钙素因相关肽(CGRP)试剂盒新茜素络合指示剂 IndicatorDL-α-氨 98%
降钙素因相关肽(CGRP)试剂盒新二氢查尔茜素 97%R-(-)-1,2- 99%
(SS)试剂盒新内酯苯蓝,溶 Biological stain(S)-(+)-1,2- 98%
(SS)试剂盒新对叶百部茜素绿 AR2-苯异丁 98%
生长激素释放多肽(GHRP) 试剂盒新苦味素苯蓝(溶) BS IND4-吡啶乙盐盐 98%
生长激素释放多肽(GHRP) 试剂盒新鲁斯可皂元偶氮胭脂红G Biological stain4-(1-吡咯烷)苯 97%
CSPP1中心体纺锤体极相关蛋白1ELISA试剂盒本探针是常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。其中,大激发波长为549nm,大发射波长为565nm。
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
CAS:41085-99-8。
DiI可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF,溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
DiI被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。DiI通常不会影响细胞的生存力。被DiI标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。DiI在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day。
DiI除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
用于细胞膜荧光标记时,DiI的常用浓度为1-25μM,常用的浓度为5-10μM。DiI可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
注意事项:荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:4℃避光,有效期一年。