EPCA2早期前列腺癌抗原2ELISA试剂盒

样本实验前准备：

ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

（1）血清

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（2）血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（3）尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

（4）细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

（5）培养细胞

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（6）组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

产品属性：

检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

标本要求：

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

需要而未提供的试剂和器材：

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器

6. 蒸馏水，容量瓶等。

备试剂与收集血样：

1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。

2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。

4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

胎盘性磷(PLAP)试剂盒 十九四丁硫氢铵 98%8-氨-1-萘酚-3,6-二磺单钠盐 CP,95.0%

胎盘性磷(PLAP)试剂盒 N-反-肉桂-N--(1-萘)盐盐四丁硫氢铵 离子对色谱8-氨-1-萘酚-3,6-二磺单钠盐 80%

胎盘性磷(PLAP)试剂盒 四丁溴化磷 98%聚氧乙烯  average Mv 100,000, powder

胎盘性磷(PLAP)试剂盒 亮蓝三乙盐盐 for HPLC, ≥99.0%聚氧乙烯  average Mv ~300,000, powder

受体酪氨激(RTKs)试剂盒 化乙酰胆三乙盐盐 99%聚氧乙烯  average Mv ~600,000, powder

受体酪氨激(RTKs)试剂盒 3,5-二羟苯 过四丁铵 99%聚氧乙烯  average Mv ~900,000, powder

丝裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)试剂盒 过四丁铵 电化学级聚氧乙烯  average Mv ~1,000,000, powder

丝裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)试剂盒 过四丁铵 98%聚氧乙烯  average Mv ~2,000,000, powder

溶菌(LZM)试剂盒 磺吡四化铵 AR聚氧乙烯  average Mv ~4,000,000, powder

溶菌(LZM)试剂盒 联苯菊酯四 98%聚氧乙烯  average Mv ~5,000,000, powder

黏着斑激(FAK)试剂盒磺二氧嘧啶钠盐四 for electrochemical analysis, ≥99.0% (AT))聚氧乙烯  average Mv ~7,000,000, powder

黏着斑激(FAK)试剂盒8-羟喹啉铜氨磺 AR,99.5%1-乙-(3-二氨)碳二亚盐盐 98.5%

可溶性磷脂A2(sPL-A2)试剂盒野蔷薇A鹅去氧胆 99%1-羟-苯并-三氮唑(无水) 99%

可溶性磷脂A2(sPL-A2)试剂盒野蔷薇A金丝/金粉 99.95%L-叔亮氨 99%

脱氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)试剂盒三化锡金丝/金粉 99.999%2-羟-4-正辛氧二苯 99%

脱氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)试剂盒戊唑金丝/金粉 99.99%抗氧剂1076 98%
EPCA2早期前列腺癌抗原2ELISA试剂盒SYTOX 绿色死细胞核染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一种可轻易穿过受损细胞质膜而不能透过活细胞质膜的绿色核染料，其在于核结合之后荧光强度会得到超过500 倍的显著增强。SYTOX 绿色死细胞核染料可以用于染死的真核细胞的RNA和DNA，在革兰氏细菌中同样也适用。使用者可以利用氩激光激发器的488nm（或者其他任何带有450-490nm 激发光源的激发器）激发染料。

SYTOX 绿色死细胞核染料可用于多色荧光分析，在不同的实验应用中染固定细胞的核，如，荧光显微镜、荧光酶标仪，流式细胞仪上。

储存：-20℃，避光，有效期6个月。