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MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA试剂盒

MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA试剂盒

产品简介:MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA试剂盒公司正在销售的产品:MMP-9/FITC 荧光标记质金属蛋白-9蛋白抗体IgG3-羟 98%
MMP-9/FITC 荧光标记质金属蛋白-9抗体IgG2- 99%
MMP-/FITC 荧光标记质金属蛋白-抗体IgG4,6-二-2-嘧啶 98%
MMP-11/FITC 荧光标记质金属蛋白-11抗体IgG2,4-二嘧啶 98%
MMP-12/FIT

产品型号:48T/96T

浏览次数:41

更新时间:2022-05-26

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌货号LZ-E028639

样本实验前准备:

ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1)血清

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4)细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5)培养细胞

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6)组织标本

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

产品属性:

产品名称

MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA试剂盒

英文名称

MUC5AC ELISA Kit

产品规格

48T/96T

产品货号

LZ-E028639


QQ截图20200429162339.jpg

检测程序:

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

操作步骤:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

标本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

需要而未提供的试剂和器材:

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器

6. 蒸馏水,容量瓶等。

备试剂与收集血样:

1.  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。

2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4.  洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)

靶向核糖核(TR)试剂盒连翘酯HDL-苦杏仁 AR,99.0%氢二钠 AR(剧品)

靶向核糖核(TR)试剂盒连翘酯F氢化 98%三乙酯 99%

蛋白激C(PKC)试剂盒5--苦参C焦亚硫 CP,94.0%氟化,无水 电子级,粉末

蛋白激C(PKC)试剂盒苦参X1,10-菲罗啉(无水) 99%1,1,1,2-四氟乙烷 99.95%

(ALD)试剂盒苦参W三聚磷钠 AR,98%三 AR,99.0%

(ALD)试剂盒苦参N锡钠 AR,55.3% SnO2烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 稳定剂,98%

L-乳脱氢(L-LDH)试剂盒苦参S亚硫 AR2,2,2-三氟乙 99.5%

L-乳脱氢(L-LDH)试剂盒苦参L单宁 AR大黄素 ≥90% (HPLC)

性神经鞘磷脂(ASM)试剂盒苦参Q3,4,5-三氧苯 99%石杉 分析标准品

性神经鞘磷脂(ASM)试剂盒苦参O硫脲 ACS, ≥99.0%石杉 99%

花生四烯5脂加氧(ALOX-5)试剂盒苦参R硝氧锆 水合物 AR,99.5%和厚朴酚 分析标准品

花生四烯5脂加氧(ALOX-5)试剂盒苦参K二氧化锆 AR,99.0%杨梅素 97%

5脂加氧(5-LO/LOX)试剂盒重楼皂V氢氧化锆 97%杨梅素 分析标准品,≥98%

5脂加氧(5-LO/LOX)试剂盒重楼皂H硝氧锆 99%厚朴酚  ≥98% (HPLC)

腺环化1(AC-1)试剂盒 重楼皂D化锆 98%杨梅 98%

腺环化1(AC-1)试剂盒 伊贝A;辛贝素-3-D-葡萄糖式碳锆(IV) ≥40% ZrO2 basis 分析标准品,≥98%
MUC5AC粘蛋白/粘液素5ACELISA试剂盒橙是一种荧光色素,其检测激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA 和RNA 结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA 结合量少发绿色荧光,与RNA 结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA 和RNA 染色。

在荧光显微镜下观察,橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染,因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

用于细胞核染色时,推荐的橙工作浓度为0.1%。一般孵育条件是室温避光15 分钟。由于不同细胞对橙的摄取能力不同,该法不一定适用所有细胞。

储存:-20℃,避光,有效期12月。





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