iNOS诱导型一氧化合成酶ELISA试剂盒

服务：

公司产品仅用于科研我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

样品准备：

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

使用方法：

测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒内酯异 分析标准品，>99.7%(GC)DL-苹果 AR，99.5%

热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒垂盆钞草甙(治肝炎药)，垂盆草甙异 >99.0% (GC)(含100ppm BHT稳定剂)L-苹果 98%

热休克蛋白40(HSP-40)试剂盒垂石松 A异佛尔 97%L-苹果 CP

热休克蛋白40(HSP-40)试剂盒槐双氢黄异 ACS, ≥99.5% 顺二 AR,99.5%

热休克蛋白20(HSP-20)试剂盒槐亭烯异癸酯 98%,含70-100ppm对苯二酚稳定剂顺二 CP,99%

热休克蛋白20(HSP-20)试剂盒桐阿亭烯月桂酯 96%顺二 药用级，EP,USP

肌球蛋白(MYS)试剂盒桐酚素α-烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做稳定剂D-苹果 99%

肌球蛋白(MYS)试剂盒桐特灵α-烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做稳定剂单硬脂甘油酯 >60.0%(GC)

凝溶胶蛋白(GS)试剂盒五加甙 C异丁(MIBC)  99%单硬脂甘油酯 99%(GC)

凝溶胶蛋白(GS)试剂盒粗毛甘草素 A乙酰乙酯 CP，98%L-半胱氨 ≥98%,非动物源，用于培养

C反应蛋白(CRP)试剂盒粗毛羊藿异丁 >99.5%(GC)安息香 99.5%

C反应蛋白(CRP)试剂盒醋独活属壬酚 GR联苯酰 99.0%

固(ALD)试剂盒达玛二烯乙酯壬酚(混合物) SU安息香二 99%

固(ALD)试剂盒达玛烯二II壬酚 分析标准品1-羟环己苯 98%

肌红蛋白(MYO/MB)试剂盒大豆脑 I对壬酚 85%2-羟-2- 97%

肌红蛋白(MYO/MB)试剂盒大豆脑 II对壬酚 98%乙(95%) AR,95.0%
iNOS诱导型一氧化合成酶ELISA试剂盒荧光标记是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来，从而区别鉴别出正常细胞、坏死细胞或检测细胞周期。

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种DNA 结合性染料，其激发和发射波长分别为536nm 和617nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时，凋亡细胞因内源性核酶被激活，使DNA 广泛降解、断裂，DNA 结构发生剧变，随着凋亡的进程，DNA 断裂产生的小分子量DNA 溢出胞外，细胞总DNA 量降低，于正常G0/G1 细胞群前出现一DNA 低染细胞群，即G1 峰前出现亚二倍体峰（sub-G1）或称A0 细胞群，即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI 直接对细胞DNA 染色后，进行流式细胞仪分析，即可检测到凋亡细胞DNA 的变化。

储存：2-8℃，避光，有效期6个月。

注意事项:

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。