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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司抗体仅用于科研现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
英文名称 Anti-CK14+17+42+10
中文名称 细胞角蛋白14抗体规格
别 名 Cytokeratin 14; CK 14; ck14; Cytokeratin14; Cytokeratin-14; Dowling Meara; ebs3; Epidermolysis bullosa simplex; k14; Keratin 14; Keratin type I cytoskeletal 14; Keratin14; Koebner; Krt 14; krt14; EBS3; EBS4; NFJ; Keratin, type I cytoskeletal 14; Cytokeratin 17; CK 17; ck17; Cytokeratin17; Cytokeratin-17; Keratin, type I cytoskeletal 17; Cytokeratin 10; CK 10; ck10; Cytokeratin10; Cytokeratin-10; Keratin, type I cytoskeletal 10; Cytokeratin 42; CK 42; ck42; Cytokeratin42; Cytokeratin-42; Keratin, type I cytoskeletal 42; K1C14_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK14(281-313aa/472aa)
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
猪氨端前心钠肽(NT-ProANP)酶联免疫吸附测定试剂盒甘油蔗糖 用于分子生物学, ≥99.5% (HPLC)镱标准溶液 1000μg/ml
猪神经营养因子3(NT-3)酶联免疫吸附测定试剂盒酵母提取物琼脂硅胶 AR镱标准溶液 1000μg/ml in 10%HCl
猪淋巴功能相关抗原3(LFA-3/CD58)酶联免疫吸附测定试剂盒 6-溴吡啶-3-硫 AR,95-98%(剧品)钇标准溶液 1000μg/ml in 10% HCl
猪环指蛋白4(RNF4)酶联免疫吸附测定试剂盒6-溴吡啶-3-硫 99.999% metals basis钇标准溶液 1000μg/ml
猪葡萄糖氧化酶(GOD)酶联免疫吸附测定试剂盒 瑞替加滨硫 GR,95-98%(剧品)锌标准溶液 1000μg/ml
猪保护素(CD59)酶联免疫吸附测定试剂盒植物凝胶硫 ACS,95.0-98.0%锌标准溶液 1000mg/L,溶剂:1%盐
猪半乳糖6硫酯酶(Gal-6S)酶联免疫吸附测定试剂盒 植物凝胶硫标准溶液 0.5000mol/L(1N)锌标准溶液 500mg/L,溶剂:1%盐
猪淋巴素β受体(LTβR)酶联免疫吸附测定试剂盒 磷氢二钠,二水无水硫钠 AR,99%锌标准溶液100μg/ml,体:1%硝
猪褪黑素(MT)酶联免疫吸附测定试剂盒瑞格列奈无水硫钠 CP,98%锌标准溶液 100μg/ml
猪过氧化物酶体生物合成因子2 (PEX2)酶联免疫吸附测定试剂盒5-糠无水硫钠 SP锆标准溶液 1000μg/ml
猪血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-糠硫标准溶液 0.2500mol/L(0.5N)烯 CP,98.0%(剧品)
猪骨骼肌慢肌肌钙蛋白I(TNNI1)酶联免疫吸附测定试剂盒5-糠无水硫钠 99.99% metals basis烯 AR,99.0% (剧品)
猪质金属蛋白酶25(MMP-25)酶联免疫吸附测定试剂盒亚油酯硫标准溶液 0.05000mol/L(0.1N)烯 分析标准品(剧品)
猪葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)酶联免疫吸附测定试剂盒 亚油酯无水硫钠 ACS, ≥99.0%莰烯 分析标准品
猪优球蛋白(EL)酶联免疫吸附测定试剂盒 亚油酯无水硫钠 农残级莰烯 75%
猪抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒 雌酚无水硫钠 for HPLC,≥99.0% (T)莰烯 95%
细胞角蛋白14抗体规格猴弹性蛋白酶3B(ELA3B)酶联免疫吸附测定试剂盒 Cyclin C 周期素 C(抗原)
猴抗磷壁酸抗体(TA)酶联免疫吸附测定试剂盒 CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降钙素因相关肽
猴谷氨酸脱羧酶样蛋白1(GADL1)酶联免疫吸附测定试剂盒 CULLIN (Cdc53/CUL)
猴抗载脂蛋白A1抗体(Apo A1-Ab)酶联免疫吸附测定试剂盒 CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 色素P450单氧化酶(多肽抗原)
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猴糖链抗原19-9(CA19-9)酶联免疫吸附测定试剂盒 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原
猴血型糖蛋白E(GYPE)酶联免疫吸附测定试剂盒DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原