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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C21orf2
中文名称 21号染色体开放阅读框2抗体科研抗体
别 名 A2 antibody C21orf HUMF09G8.5; Chromosome 21 open reading frame 2; Hypothetical protein LOC755; Nuclear encoded mitochondrial protein cDNA A2 YF5; Uncharacterized protein C21orf2; YF 5; YF5; YF5/A2 antibody.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 发育生物学 神经生物学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 28kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C21orf2
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
动力蛋白胞浆1重链1(DYNC1H1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)嗜酸乳杆菌牛型放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒
皮屑蛋白样蛋白1(LEPREL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)彩色豆马勃腺病E型探针法荧光定量PCR试剂盒
葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)游动球菌马节杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
因子信号转导抑制因子3(SOCS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小粒凯斯特亚菌异尖线虫属探针法荧光定量PCR试剂盒
神经蛋白聚糖(NCAN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Patulibacter americanus腺病通用探针法荧光定量PCR试剂盒
接触蛋白关联蛋白样蛋白2(CNTNAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大肥菇化脓放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒
溶质载体家族39成员6(SLC39A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)卷枝毛霉卷枝变型温和气单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒
因子信号转导抑制因子2(SOCS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)解淀粉芽孢杆菌无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
因子信号转导抑制因子1(SOCS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大豆慢生根瘤菌禽类支原体通用探针法荧光定量PCR试剂盒
磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)黏连环纹炭团菌马隐秘杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
成纤维生长因子19(FGF19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)香菇鸟类多瘤病探针法荧光定量PCR试剂盒
90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)球形赖氨酸芽孢杆菌构巢曲霉探针法荧光定量PCR试剂盒
CD160分子(CD160)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猪丹丝菌寄生曲霉探针法荧光定量PCR试剂盒
色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)多主枝孢地衣形芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
促肾上腺皮质激素样中叶肽(CLIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)酿酒酵母疱疹病探针法荧光定量PCR试剂盒
21号染色体开放阅读框2抗体科研抗体猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒永生化食管上皮Anti-MMP-11/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶-11抗体IgG
猪蛋白激酶抑制剂γ(PKIγ)酶联免疫吸附测定试剂盒人成巨核白血病Anti-MMP-12/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶-12/巨噬金属弹力蛋白酶抗体IgG
猪信号传导转录激活因子1(STAT1)酶联免疫吸附测定试剂盒人滑膜关节炎成纤维Anti-MMP-13 /FITC 荧光素标记质金属蛋白酶13抗体IgG
猪胰腺再生蛋白3α(REG3α)酶联免疫吸附测定试剂盒猪肾Anti-MMP-14/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶-14抗体IgG
猪促生长激素释放激素(GHRH)酶联免疫吸附测定试剂盒 人精原瘤Anti-MMP-15/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶-15抗体IgG
猪乙酰胆碱酯酶(AChE)酶联免疫吸附测定试剂盒 人小肠正常Anti-MMP-16/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶-16抗体IgG
猪特异性巨噬武装因子(SMAF)酶联免疫吸附测定试剂盒 人导管瘤Anti-MMP-17/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶-17抗体IgG
猪免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)酶联免疫吸附测定试剂盒 人宫颈上皮永生化Anti-MMP-20/FITC 荧光素标记质金属蛋白酶20抗体IgG