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细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)

产品简介

细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)的销售产品:GHDC蛋白抗体MBP/FITC 荧光素标记髓鞘碱性蛋白抗体IgG
甘油激5抗体MBP/HRP 辣根过氧化物标记髓鞘碱性蛋白抗体IgG
55-55-0米吐尔DMEM细胞培养基
荚膜红细菌DMEM细胞培养基(无红)
1667-99-8铬天青SRPMI 1640细胞培养基
连翘脂CAS:487-39-8(0.05%)乙二胺四乙混合液

更新时间:2022-06-20
访问次数:1307

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中文名称:细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)

英文名称:Hoechst Staining Kit
产品规格:100次

产品货号:LZ-01X6323

发货周期:1~3天

商品介绍:

本试剂盒提供了一种经典而又快速简便的细胞凋亡检测方法。细胞发生凋亡时,染色质会固缩。所以Hoechst 33258染色后,在荧光显微镜下观察,正常细胞的细胞核呈正常的蓝色,而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染,颜色有些发白。

试剂盒特点:

1. 只需25分钟即可完成细胞凋亡检测的整个过程。

2. 本试剂盒提供了固定液,染色液,及抗荧光淬灭封片液。

3. 本试剂盒对贴壁细胞,悬浮细胞和组织切片均适用。

4. 足够检测100个样品。

试剂盒组份:

固定液————————————50ml

Hoechst 33258染色液 —————50ml

抗荧光淬灭封片液 —————— 5ml

公司产品现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

7.jpg 

培养操作步骤:

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

注意事项:

1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

转化生长因子β2(TGF-β2)英文名称:TGF-β2 ELISA Kit载脂蛋白E4抗体包装25g

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转化生长因子α(TGFα)英文名称:TGFα ELISA Kit磷化失调症蛋白1抗体包装1g

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肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)英文名称:TGSF ELISA Kit磷化活化复制因子2抗体包装5g

肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子(TWEAK)英文名称:TWEAK ELISA Kit磷化钠ATP蛋白a1抗体包装100g

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)英文名称:TRAIL-R4 ELISA Kit磷化钠ATP蛋白a1抗体包装25g

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)英文名称:TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗体包装100g

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)英文名称:TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗体包装25g

磷化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)立枯丝核 五-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖1,25二羟基维生DElisa

盘长孢状盘孢 比多巴1,25-二羟基维生D3Elisa

红鬼笔 紫苏1,3-二磷酸甘油酸Elisa

伯克霍尔德 盐酸芬他林1,4,5-三磷酸肌Elisa

环圈链霉 乙酰甲喹1,5-脱水葡萄糖;1,5-脱水山梨Elisa

青霉 β-烟酰单核苷酸11去氢血栓烷B2Elisa

阿舒假囊酵母 氟化锶11脱氢血栓B2Elisa

曲霉属 香叶木1-3-β-D葡聚糖Elisa

解脂假丝酵母 DL-薄荷14-3-3蛋白etaElisa

白布勒担孢酵母 N-(2',6'-二甲苯基)-2-甲酰15脂加氧Elisa

白灵侧耳 高良姜17β-雌二Elisa

灵芝属 聚氧烯甘油GP17-羟皮质类固Elisa

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澳型核果褐腐病 7-异氧基异黄酮17-酮皮质类固Elisa

玉米大斑病 1α羟化Elisa


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