大米CrylAc基因PCR检测试剂盒价格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
1,3-Dibromobenzene烟酸乙酯 99%1,2,4-三氮唑 99%

2,2'-Biphel3-哌啶甲酸乙酯 98%1,2,4-三氮唑 分析标准品

DMB4-氯甲酰基丁酸甲酯 98%硫酸钕 SP

Biphenyl4'-羟基苯戊酮 98%硫酸钕 99.99%

Iodobenzene5-甲基异噁唑-4-甲酸 98%氯化镨 99.99% metals basis

4-Methoxyazobenzene3-氨基-4-甲基噻吩-2-甲酸甲酯 98%氯化镨 99.9% metals basis

1,3,5-Tribromobenzene10-甲氧基亚氨基芪 98%氯化铽,六 99.9% metals basis

Ethyl benzene3-甲氨基  98%氯化铽,六 99.999% metals basis

Pseudocumol3-甲氨基胺 98%二烷  96%

DAN奥卡西平 98%胡椒 CP,99.0%（易制）

1,4-Dihydroxynaphthalene4-吡啶乙酸盐酸盐 98%3'-氨基苯乙酮 97%

1,5-Dihydroxynaphthalene二氯化磷酸苯酯 98%3-溴代苯乙酮 98%

1-Bromonaphthalene3-吡啶乙酸盐酸盐 99%2,4-二甲 97%

Zinc3,4,5-*氧基苯乙 97%对氨基苯乙 98%

Zinc1,2,3,4-四氢-1-萘胺  98%亚氨基二乙 95%

Zinc3,4,5-*氧基 98%亚铁化钠 AR

异硫酸1-萘酯(>98.0%(GC))Olfm4 (D6Y5A) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)KCNMB1/Maxi Potassium channel beta  钙激活通道蛋白β1抗体

(>98.0%(GC))Olfm4 (D6Y5A) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)KCNK9/KCNK3  酸敏感离子通道蛋白3抗体

3,5-二甲酰氯(>99.0%(T))p56Dok-2 AntibodyKCNK  TWIK相关酸敏感离子通道蛋白9抗体

2,4-二肼盐酸盐(>98.0%(HPLC)(T))CD45 (HI30) Mouse mAb (redFluor™ 710 Conjugate)KCNJ5  G蛋白激活内向通道5抗体

O-4-硝基苄基羟胺盐酸盐(>99.0%(HPLC),用于高效液相色谱标记)DDR1 AntibodyKCNH1/EAG1  离子通道蛋白EAG1抗体

氮苯磺酰肼(>99.0%(HPLC),用于高效液相色谱标记)PhosphoPlus® mTOR (Ser2448) Antibody DuetKCNG4/KV6.3  离子通道蛋白G蛋白4抗体

7-乙酰氧基-4-溴甲基(>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色谱标)Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135) (DA7A8) Rabbit mAbKCNG2  心脏离子通道蛋白亚基2抗体

Br-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135) (DA7A8) Rabbit mAbKCNE2  离子通道蛋白家族成员2抗体

3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并恶-2-酮(>98.0%(T))Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) AntibodyKCNE1L  离子通道蛋白家族成员1样蛋白抗体

DBD-PZ [=4-(N,N-二甲氨基磺酰基)-7-哌-2,1,3-苯并恶二唑](>98.0%(HPLC))Bag1 (3.10G3E2) Mouse mAbKCNE1  离子通道蛋白家族成员1抗体
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