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猪麻疹病毒PCR检测试剂盒规格

产品简介

猪麻疹病毒PCR检测试剂盒规格
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GLUT1检测试剂盒要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

更新时间:2021-03-13
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 猪麻疹病毒PCR检测试剂盒规格

 英文名称

 Porcine Rubulavirus(PoRV) RTPCR

 货号

 LZP7172

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
2,4-Dimethoxybenzaldehyde俾斯麦棕Y Biological stain丹参酮I  分析标准品,≥98%

3-Fluorobenzaldehyde2-氯-3-硝基吡啶 >99.0% (HPLC)他克莫司 分析标准品,≥98%

4-Fluorobenzaldehyde2-羟基吡啶 97%他克莫司 ≥98% (HPLC)

PHBA桑色素 Indicator3,3’-二没食子酸酯茶黄素 分析标准品, ≥98.0% (HPLC)

4-Methoxybenzaldehyde桑色素 分析标准品,≥98知母皂苷A-Ⅲ 分析标准品,≥97%

2-Nitrobenzaldehyde2-甲基-3-三氟胺 99%细辛 分析标准品,≥98%

3-Nitrobenzaldehyde  ≥99.0% (HPLC)四氢巴马汀 分析标准品,≥98%

4-Nitrobenzaldehyde酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:甲香蒲新苷 分析标准品,≥98%

Phenylacetaldehyde三酚 植物细胞培养级,>99.0% (HPLC)延龄草苷 分析标准品,≥98%

OPA间,二 99%乙酰蒲公英萜 分析标准品,≥90%

p-Phthalaldehyde苯酸 97%鸢尾黄素 分析标准品,≥97%

Methylglyoxal罗丹明6G Biological stain牡荆素-2-O-鼠李糖苷 分析标准品,≥98%

Undecanal硫酸氧钛 synthesis grade汉黄芩素 分析标准品,≥99%

3,4-二甲氧基3,4-Dimethoxybenzaldehyde硫酸氧钛 93%叶黃素 分析标准品,90%

Vanillin2-溴-3-羟基吡啶  98%育亨宾 分析标准品,≥98%

Sodium molybdate dihydrate2-氯-3-羟基吡啶 98%4-叔丁基苯甲酸 99%

β-葡聚糖酶Rab25 (D4P6P) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2  兔抗人IgG F(ab')2

2-脱氧-L-胸苷/替比夫定Phospho-ATM (Ser1981) (D25E5) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG

替比夫定(标准品)SimpleChIP® Human IFN-γ Promoter PrimersRabbit Anti-human IgA  兔抗人免疫球蛋白A

轮环藤宁/1,4,7,10- 四氮杂环十二烷 STAM1 AntibodyRabbit Anti-horse IgM/RBITC  罗丹明标记的兔抗马IgM

雷替曲塞DyLight™ 554 PhalloidinRabbit Anti-horse IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗马IgM

L-鸟氨酸 L-天门冬氨酸盐PX-866Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗马IgM

双嘧达莫DAZL (D2A4) Rabbit mAb (IHC Specific)Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗马IgM

他米巴罗汀SimpleChIP® Mouse ATF-3 Intron 1 PrimersRabbit Anti-horse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗马IgM

文多灵VAMP8 AntibodyRabbit Anti-horse IgM/PE  PE标记的兔抗马IgM

罗丹明B;玫瑰红BPhospho-α-E-Catenin (Ser652) AntibodyRabbit Anti-horse IgM/HRP  辣根过氧化物酶标记的兔抗马IgM
猪麻疹病毒PCR检测试剂盒规格人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人他克莫司(FK506)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25克

人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5毫克

人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT支

人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃25毫克

人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

人胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25毫克
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 

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