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单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒​操作步骤

更新时间:2021-11-24点击次数:584

单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒操作步骤:

1、贴壁细胞的消化

①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。

③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变

化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。000~2000g 离心 min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞

QBC-939, 人胆管癌细胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞

SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞

SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞

A549, 人肺癌细胞系

SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株

A-375 [A375], 人恶性黑素瘤细胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株

SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞

WM35, 人黑色素瘤细胞

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌细胞株

U-2 OS, 人骨肉瘤细胞

WM451, 人黑色素瘤细胞

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞

C6, 大鼠脑胶质瘤细胞

UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌

Hela, 人宫颈癌细胞系

HNE2, 人鼻咽癌细胞系

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系

786-O [786-0], 人肾透明腺癌细胞

HEC-1A, 人子宫内膜癌细胞系

Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞


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