大鼠ELISA试剂盒样品的收集、处理及保存

更新时间：2021-06-10

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　　大鼠ELISA试剂盒的样品类型(SAMPLE TYPES)上标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须有产品说明书。收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

　　大鼠ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被活性氧簇（ROS）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧簇（ROS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

　　大鼠ELISA试剂盒样品的收集、处理及保存方法：

　　1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

　　3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

　　5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。