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贝氏贝诺孢子虫PCR检测试剂盒​反应五要素

更新时间:2022-10-25点击次数:533

贝氏贝诺孢子虫PCR检测试剂盒反应五要素:


参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:


①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。


②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。


③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。


⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。


⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。


⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。


引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

血红蛋白α亚基(HB-α)ELISA试剂盒

血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒

血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒

血红蛋白(Hb)ELISA试剂盒

血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒

血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA试剂盒

血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒

血管性血友病因子(VWF)ELISA试剂盒

血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒

血管生长素(ANG)ELISA试剂盒

血管生成抑制因子(Arresten)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR1)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子E(VEGF-E)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子A(VEGF-A)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子(VEGF165)ELISA试剂盒

血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒

血管内皮生长因子受体3(VEGFR3/Flt4)ELISA试剂盒

血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒

血管内皮生长因子121(VEGF121)ELISA试剂盒

血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒

血管紧张肽酶A(ATA)ELISA试剂盒


TEL:021-61210612

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