荧光-PCR法的主要理论依据说明

荧光-PCR法是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程。PCR扩增时加入一对引物和一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，淬灭基团抑制报告基团的荧光发射。刚开始时，探针结合在DNA任意一条单链上，PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团发生分离，抑制作用被解除，从而荧光监测系统可接收到荧光信号。随着PCR反应的进行，反应产物不断累...

恩杜姆病毒PCR检测试剂盒RNA质量检测

恩杜姆病毒PCR检测试剂盒RNA质量检测：1）紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液浓度和纯度。浓度测定A260下读值为1表示40gRNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为：A260×稀释倍数×40g/ml。具体计算如下：RNA溶于40lDEPC水中，取5ul，1:100稀释至495的TE中，测得A260=0.21RNA浓度=0.21×10...

败血梭状芽胞杆菌PCR检测试剂盒液体类标本收集

败血梭状芽胞杆菌PCR检测试剂盒液体类标本收集：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1）血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2）血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。3）尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3...

帕腊南病毒PCR检测试剂盒反应流程常规程序

帕腊南病毒PCR检测试剂盒反应流程常规程序：将PCR反应所需的成分配置完后，在PCR仪上于94-96℃预加热几十秒至几分钟，使模板DNA充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于94℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度（一般50-60℃之间），一般保持30秒钟，使引物与模板充分退火；在72℃保持1分钟（扩增1kb片段），使引物在模板上延伸，合成DNA，完成一个循环。重复这样的循环25～35次，使扩增的DNA段大量累积。在72℃保持3-7min，使产物延伸完整...

玛尔摩分枝杆菌PCR检测试剂盒实验注意事项

玛尔摩分枝杆菌PCR检测试剂盒实验注意事项：1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。实时荧光定量PCR（quantitativereal-timePCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，...

蛙病毒PCR检测试剂盒实验规则

蛙病毒PCR检测试剂盒实验规则：1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。4、实验时，要使底物避光保存。5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。7、将液...

LAMP试剂盒所体现的扩增技术探讨

LAMP试剂盒的性状为盒装液体，在运输方面一般为快递运输，产品广泛用于科研而不用于临床。对于PCR方法来说在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用，其灵敏度高、特异性好，是目前准确的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂，对仪器和人员要求比较高，不适合基层或现场快速诊断，因此在国内的推广速度并不是很快。21世纪初日本学者公开了一种新的基因诊断技术，即LAMP(Loop-mediatedisothermalamplification)，中文名...

马尔太虫通用PCR检测试剂盒实验注意事项

马尔太虫通用PCR检测试剂盒实验注意事项：1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。实时荧光定量PCR（quantitativereal-timePCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*...