TPS总蛋白SELISA试剂盒

标本要求：

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

产品属性：

需要而未提供的试剂和器材：

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器

6. 蒸馏水，容量瓶等。

备试剂与收集血样：

1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。

2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。

4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备：

ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

（1）血清

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（2）血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（3）尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

（4）细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

（5）培养细胞

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（6）组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

CC趋化因子受体1(CCR1)试剂盒白绵马素AA3-氨-2-恶唑烷 分析标准品土贝母苷 分析标准品，>95%

CC趋化因子受体1(CCR1)试剂盒白绵马素AP抗坏血钙 分析标准品高铵 AR

CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)试剂盒白皮杉阿特拉津 分析标准品，99%大黄酚 97%

CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)试剂盒白屈菜红1-氨-5-萘酚 97%大黄素 ≥90% (HPLC)

肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)试剂盒 白屈菜4-雄烯-11β--3,17-二大黄 分析标准品，≥98%

肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)试剂盒 白术内酯Ⅰ2,2-双[4-(4-氨苯氧)苯]烷 98%大黄 98%

黏膜地址素黏附分子(MAdCAM-1)试剂盒白术内酯Ⅱ3-溴肉桂 98%达旦黄 CP

黏膜地址素黏附分子(MAdCAM-1)试剂盒白术内酯III1，4-二（三硅烷）苯 96%烯缩水甘油酯 98%

β干扰素(IFN-β/IFNB)试剂盒白头翁素二烯1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 稳定剂, 95%亚硫氢 AR

β干扰素(IFN-β/IFNB)试剂盒白头翁皂苷A二烯1,3-丁二酯, 含500 ppm 对苯二酚（HQ）稳定剂, 98%乙 99%

可溶性CD38(sCD38)试剂盒白头翁皂苷B苯磺 98%乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)

可溶性CD38(sCD38)试剂盒白头翁皂苷B4正丁硫 standard for GC, ≥99% (GC)冰乙 AR,99.5%

可溶性CD21(CR2/sCD21)试剂盒 白头翁皂苷DN-丁二乙 99%反式 GR,99.0%(剧品)

可溶性CD21(CR2/sCD21)试剂盒 白鲜双酚A三双烯酯 试剂级正丁  >99.5%(GC)

可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒白杨素1-苄哌 97%正丁  ACS, ≥99.4%

可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒白杨素-7-葡萄糖苷3-溴 分析标准品，用于环境分析乙丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)
TPS总蛋白SELISA试剂盒细胞存活率检测试剂盒是通过检测细胞膜的完整性来检测细胞的存活率。通常情况下细胞膜丧失即可认为细胞研究死亡，本试剂盒中染料不能使正常健康保持完整细胞膜的细胞染色，而可以使细胞膜不完整的细胞染色，通过显微镜下直接计数拍照后计数，就可以对细胞存活率进行精确的定量。

储存条件：2-8℃避光保存。

有效期：一年。