MCF-12A细胞

运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

服务流程：

（1）客户提供：目的细胞具体信息；

（2）公司产品仅用于科研操作过程：细胞复苏培养，细胞发货；

（3）交付内容：细胞系/细胞株，以及细胞使用说明书。

培养方法：

收到后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

a，弃去培养液，用PBS洗1-2次。

b，向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

c，加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

d，传代比例：1:2-1:3

收到如何处理:

1、首先，观察培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
曼陀罗萜酮Bromothymol Blue 溴百里酚蓝食物总抗氧化能力（TAC）比色法（DDPH）定量检测试剂盒

10-羟基-6-铁屎米酮Bromothymol Blue 溴百里酚蓝食物总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒

脱氢山楂酸Paclobutrazol 多效唑食油柠檬酸比色法定量检测试剂盒

5,6,3',4'-四羟基-7-甲氧基黄酮Potassium iodide 化 适配体（ADAPTER）连接试剂盒

仙茅木酚素5-FAM    5-Carboxyfluorescein 5-羧基荧光素噬菌体粗提试剂盒

香草酸甲酯糖苷5-FAM [5-Carboxyfluorescein] *Single isomer*  5-羧基荧光素（单一化合物）噬菌体溶菌斑点免疫杂交筛选试剂盒

马尾柴酸5-FAM [5-Carboxyfluorescein] *Single isomer*  5-羧基荧光素（单一化合物）噬菌体溶菌斑点杂交筛选试剂盒

喇叭茶5-FAM [5-Carboxyfluorescein] *Single isomer*  5-羧基荧光素（单一化合物）噬菌体稀释缓冲液

愈创木素Triphenylmethyl chloride 三苯基氯噬菌体选择培养基I

黄独素Drac-GR24独角金内酯噬菌体选择培养基II

重楼皂苷VIIrac-GR24独角金内酯受精（fertilization）培养液

竹叶椒碱rac-GR24独角金内酯蔬菜乙酸比色法定量检测试剂盒

槐定碱Thymolblue  百里香酚蓝

蔬菜乙酸激酶法定量检测试剂盒

齿孔Thymolblue  百里香酚蓝

树脂法骨DNA萃取试剂盒

桑辛素 C百里酚蓝树脂法DNA萃取试剂盒
MCF-12A细胞T受体(TCR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TDRD3 ELISA Kitγ氨基丁酸受体相关蛋白样1抗体

免疫球蛋白A (IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TCF7L1 ELISA Kit法尼基二磷酸合酶1抗体

AMP活化蛋白激酶α1(PRKAα1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TCF7 ELISA Kit鸟嘌呤核苷酸结合蛋白1抗体

前列腺素E受体2(EP2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CD52(CAMPATH-1 antigen) ELISA Kit胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体

核糖核酸酶III(RNASEN)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TCERG1 ELISA Kitβ半乳糖苷酶抗体

C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TCHP ELISA Kit巨轴索蛋白GAN抗体

神经激肽A(NKA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TCF12/HEB ELISA KitG蛋白偶联受体结合蛋白O亚基A2抗体

细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。