TAF肿瘤血管生长因子ELISA试剂盒

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服务：

公司产品仅用于科研我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

样品准备：

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

使用方法：

测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

注意事项:

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

抗钙蛋白抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA it马兜铃C乙戊酯 CP,98.5% 丁位癸内酯 98%

抗钙蛋白抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA it马兜铃茴香 98%邻氨苯酯 98%

卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒马来乙缩 CP,97%位癸内酯 98%

卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒马钱乙缩 Standard for GC，>99%（GC)邻氨苯酯 ≥98%, FCC, Kosher

抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)试剂盒 马钱乙缩 98%正癸 98%

抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)试剂盒 买麻藤乙缩 ≥98%, FG1,4-二氧苯 99%

系统性红斑狼疮(SLE)试剂盒 麦冬元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖茴香烯 99%一缩二 99%

系统性红斑狼疮(SLE)试剂盒 麦冬黄烷A乙溶液 35 wt. % in H2O一缩二 98%

抗抗体(GM1)试剂盒麦冬内酯A位戊桂 97%癸 97%

抗抗体(GM1)试剂盒麦冬皂A杨梅 98%2,5-二吡 98%

抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)试剂盒 麦冬皂B乙戊酯 ≥99%丁位十二内酯 98%

抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)试剂盒 麦冬皂C2,3-丁二 98%乙癸酯  98%

抗中性粒颗粒抗体(ANGA)试剂盒麦冬皂D丁丁酯  Standard for GC, ≥99.5% (GC)乙二苄原酯 99%

抗中性粒颗粒抗体(ANGA)试剂盒麦冬皂D'丁丁酯  >99.0%(GC)乙二苄原酯 98%, FCC, Kosher

抗中性粒抗体(ANA)试剂盒 麦角甾苯苄酯 CP,98.0%2,6-二-2-庚 99%

抗中性粒抗体(ANA)试剂盒 麦芽糖苯苄酯  >99.0%(GC)癸乙酯 99%
TAF肿瘤血管生长因子ELISA试剂盒本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，释放出游离的硝基pNA，后者呈黄色在405nm具有大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定，吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。

细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD，与ICE有51%的同源性，在过量表达时可诱导凋亡发生。

所需仪器：酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长：大吸收波长405nm，如不具备也可在400～450nm范围内测定。