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TSGF肿瘤特异性生长因子ELISA试剂盒

产品简介

TSGF肿瘤特异性生长因子ELISA试剂盒公司正在销售的产品:HDAC4/FITC 荧光标记组蛋白去酰化4抗体IgG Standard for GC
Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)/FITC 荧光标记化组蛋白去酰化4、5、7抗体IgG/电子级 电子级
Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/H

更新时间:2022-05-26
访问次数:617

产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

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产品属性:

产品名称

TSGF肿瘤特异性生长因子ELISA试剂盒

英文名称

TSGF ELISA Kit

产品规格

48T/96T

产品货号

LZ-E028565

需要而未提供的试剂和器材:

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器

6. 蒸馏水,容量瓶等。

标本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

备试剂与收集血样:

1.  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。

2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4.  洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)


QQ截图20200429162339.jpg

检测程序:

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备:

ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1)血清

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4)细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5)培养细胞

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6)组织标本

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

抗磷壁抗体(TA)试剂盒 绵马贯众素ABBA正癸 98%乙叶酯 98%

抗磷壁抗体(TA)试剂盒 绵马ABA琥珀二乙酯 98%乙叶酯 ≥98%, FCC, FG

抗淋巴抗体(ALA/LCA)试剂盒 棉酚琥珀二乙酯 99%反式-2-己烯 97%

抗淋巴抗体(ALA/LCA)试剂盒 棉籽糖琥珀二乙酯 standard for GC, ≥99.6% (GC)正己 98%

抗巨噬抗体(anti-macrophage Ab)试剂盒 莫诺苯宗癸二二乙酯 98%正庚 97%

抗巨噬抗体(anti-macrophage Ab)试剂盒 莫诺癸二二乙酯 standard for GC正庚 standard for GC, ≥98% (GC)

抗状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)试剂盒 牡丹皮C癸 97%反-2-己烯  99%

抗状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)试剂盒 牡荆内酯癸 ≥95%, FCC, Kosher 己叶酯 98%

抗红抗体(RBC)试剂盒 二氢 99%反式-2-己烯 98%

抗红抗体(RBC)试剂盒 精铵盐二氢 Kosher, FCC, ≥99%反式-2-己烯 ≥98%, FCC, FG

28S抗核糖体抗体(28S rRNP)试剂盒 葡萄糖二苄 97%反-3-己烯-1- 97%

28S抗核糖体抗体(28S rRNP)试剂盒 鼠李糖二苄 ≥98%, FCC惕各叶酯 97%

抗核仁抗体(ANA)试剂盒 牡荆油正癸 ≥98%, FCC, FG惕各叶酯 97%,Kosher

抗核仁抗体(ANA)试剂盒 木蝴蝶A癸 natural, ≥92%2-辛环戊  98%

抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)试剂盒 木蝴蝶B庚乙酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-己环戊 98%

抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)试剂盒 木兰花庚乙酯 CP,97%苯叶酯 97%
TSGF肿瘤特异性生长因子ELISA试剂盒本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-2活性。测定原理基于Caspase-2特异水解其多肽底物N-acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-VDVAD-pNA),释放出游离的硝基pNA,后者呈黄色在405nm具有大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-2的水解活性。

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-2也称Ich-1或Nedd-2,在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。

运输及保存:试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定,但灵敏度略降。

操作步骤:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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