MVP主要穹窿蛋白ELISA试剂盒公司正在销售的产品:GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC 荧光标记颗粒B抗体IgG萘绿B BSgremlin/FITC 荧光标记骨形态形成蛋白拮抗蛋白抗体IgG对 ARGRGDS/FITC 荧光标记抗粘附多肽抗体IgG2- 98%GRO Alpha/FITC 荧光标记兔抗生长调节致癌因α抗体IgG5-硝苊 85.0%GRK1
产品分类
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产品名称 | MVP主要穹窿蛋白ELISA试剂盒 |
英文名称 | MVP ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E028555 |
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
乙酰肝素(HPA)试剂盒定N-苄氧羰-L-色氨 98%正戊酰 98%
乙酰肝素(HPA)试剂盒红素氟 99.99% metals basis AR,50 % in H2O
Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)试剂盒 吉氟 AR,40.0%DL-3-氨丁 97%
Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)试剂盒 素葡萄糖,一水 98%(S)-3-氨-1,2- 98%
纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒 内酯葡萄糖,一水 USP,药用级 N-乙酰-D-缬氨 97%
纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒 内酯玉米淀粉 药用级5-氨戊 97%
胃泌素抗体(GCA)试剂盒 内酯三溴化 99.999%N-乙酰-L-异亮氨 98%
胃泌素抗体(GCA)试剂盒 乙素三溴化 99.9%DL-2-氨丁 99%
谷氨脱氢(GDH/GLDH)试剂盒 雷帕三氟化乙络合物 98%DL-α-氨异丁 98%
谷氨脱氢(GDH/GLDH)试剂盒 类叶升麻三氟化乙 46.5%BOC-L-缬氨 99%
肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)试剂盒 藜芦三氟化乙 98%BOC-D-丝氨 98%
肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)试剂盒 藜芦三氟化四络合物 48-50%溶液1-苄哌 97%
胆(CA)试剂盒 藜芦三氟化乙络合物 97%BOC-D-缬氨 98%
胆(CA)试剂盒 藜芦三氟化络合物 50-52 wt% BF3 巴豆 98%
幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)试剂盒里奥林丹皮酚 99%Fmoc-beta-氨 99%
幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)试剂盒利卡灵-B叔丁 GR,≥99.5% (GC)N-羟硫代琥珀酰亚 98%
MVP主要穹窿蛋白ELISA试剂盒KOD DNA polymerase 是从克隆有α –型高保真DNA聚合酶的大肠杆菌中分离纯化所得,具有3`→5`核外切酶活性,保真性能比普通Taq聚合酶高80倍。具有较高的延伸速率,在推荐的条件下大于每分钟2kb,PCR产物为平端,可与直接接入本公司Blunt平端连接载体中。用于高保真、快速扩增目标DNA,环拉法引入点突变,补平DNA粘性末端等。
经酶切实验检测无外源核酶污染,PCR方法未检测到宿主DNA残留,能够有效扩增大肠杆菌基因组DNA。
酶活定义:
在推荐的缓冲反应体系中,以大马哈鱼精DNA为模板,68℃、30min内合成10nmol核所需要的酶量为一个活性单位。
保存条件:
储存溶液为:50mM Tris-HCl(pH7.6),50mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%(V/V) glycerol,-20℃存放一年,无明显活性丧失。冰袋运输 。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。