TGFβ2转化生长因子β2ELISA试剂盒

产品属性：

需要而未提供的试剂和器材：

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器

6. 蒸馏水，容量瓶等。

标本要求：

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

备试剂与收集血样：

1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。

2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。

4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备：

ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

（1）血清

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（2）血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（3）尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

（4）细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

（5）培养细胞

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（6）组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 金刚烷1-三硅烷-1-己炔 98%N,N,N',N'-四-O-(N-琥珀亚)脲六氟磷盐  98% 好

周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 金合欢素三乙3--4-膦酰-2- 80%三(N,N-四亚)磷酰 98%

周期素D1(Cyclin-D1)试剂盒金雀花四氢对苯醌 Indicator1-对苯磺酰-3-硝-1,2,4-三唑  98%

周期素D1(Cyclin-D1)试剂盒金色酰酯三（4 -氧- 3 ,5 -二苯）膦 500mg1-对磺酰咪唑 99%

内皮抑素(ES)试剂盒金石蚕2-三硅乙炔噻吩 97%O-(N-琥珀酰亚)-N N N'N'-四四氟脲  97%

内皮抑素(ES)试剂盒金丝桃四硫氢铵 离子对色谱级，≥99.0% (T)2,4,6-三吡啶三  99%

铁蛋白(FE)试剂盒金丝桃素（±）-α-烟酚三(2-羧乙)膦盐盐 98%

铁蛋白(FE)试剂盒金松双黄化铥(III) 无水 粉末,99.9% metals basis叠氮三硅烷 93%

微量转铁蛋白(MTF)试剂盒筋骨草甾C尿-5′-二磷钠盐 98%O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四脲四氟酯 98%

微量转铁蛋白(MTF)试剂盒京尼平溴乙烯 1.0 M THF溶液2,4,6-三异苯磺酰 97%

质金属蛋白组织抑制因子1(TIMP-1)试剂盒京尼平乙烯溴化镁 1.0M in THFN,N,N′,N′-四脒六氟磷盐 99%

质金属蛋白组织抑制因子1(TIMP-1)试剂盒京尼平龙胆双糖维B6 分析标准品N,N,N',N'-四-O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三-3-)脲四

髓鞘性蛋白抗体(MBP)试剂盒九里香缬草烯 98%N,N,N',N'-四脒六氟磷盐 98%

髓鞘性蛋白抗体(MBP)试剂盒D-D-缬氨酰-L-亮氨酰-L-赖氨酰-对- 98%伍德沃德氏试剂K 98%

组织多肽抗原(TPA)试剂盒长春瑞滨3-环氧乙-7-氧杂二环[4,1,0]庚烷 96%魏因勒卜链接剂 98%

组织多肽抗原(TPA)试剂盒长春质木糖 分析标准品印刷标签,用于25G(ML)及以下包装,尺寸: 94mm*28mm
TGFβ2转化生长因子β2ELISA试剂盒细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期组成。G1 期：细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。S 期：DNA 开始合成，这时细胞核内DNA的含量介于G1 期和G2 期之间。当DNA 复制结束成为4倍体时，细胞进入G2 期。G2 期的细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M 期。因此，单纯从DNA含量无法区分G2 期和M 期。一旦有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，这两个细胞或者进入下一个细胞周期，或者进入静止期(G0期)，而G0 期从DNA含量上同样无法与G1 期区分。因此，整个复制周期可以描述为G0/G1、S、G2/M 期。通过核染料PI标记DNA,并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在肿瘤病理学研究中，通常以S 期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标。

PI 为插入性核荧光染料，能选择性的嵌入核DNA和RNA 双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA 复制的S 期细胞的荧光强度为1-2 之间。

细胞周期检测试剂盒是利用细胞内DNA 能够和荧光染料结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。

储存条件：-20℃避光保存。

有效期：一年。

操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。