品牌 | 其他品牌 | 货号 | LZ-E028768 |
---|
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
产品属性:
产品名称 | NO一氧化化氮ELISA试剂盒 |
英文名称 | NO ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E028768 |
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠抗凝血受体(ATR)试剂盒玻璃珠(3-4㎜)二硫化碳 低苯级,low benzene, ≥99.9%异钩藤 分析标准品,≥98%
小鼠凝血受体(TR)试剂盒玻璃珠(4-5㎜)环戊烷 for HPLC,农残级,≥75% (GC)异绿原B 分析标准品,≥98%
小鼠凝血受体(TR)试剂盒玻璃珠(5-6㎜)环己烷 ACS光谱级, ≥99.5% (GC)异莲心 分析标准品,≥98%
小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒玻璃珠(6-7㎜)三 for HPLC, ≥99.8%(剧品)蒙花 分析标准品,≥98%
小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒国产石蜡1,2-二乙烷 for HPLC, ≥99.9%木兰脂素 分析标准品,≥98%
小鼠磷肌3激(PI3K)试剂盒国产石蜡乙乙酯 农残级莲心 分析标准品,≥98%
小鼠磷肌3激(PI3K)试剂盒国产石蜡氟罗里硅土 农残级盐巴马汀 97%
小鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒透析用玻璃纸正庚烷 农残级, ≥99%(GC)盐巴马汀 分析标准品
小鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒试管帽正庚烷 for HPLC, ≥99%(GC)焦袂康 分析标准品,≥98%
小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)试剂盒N+尼龙膜异辛烷 for HPLC,>99% (GC)β-五没食子酰葡萄糖 分析标准品
小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)试剂盒试管帽异辛烷 ACS, ≥99.0%β-五没食子酰葡萄糖 96%
小鼠蛋白激B(PKB)试剂盒移液枪吸头异丁 for HPLC, ≥99.5%(GC)青阳参甙元 分析标准品,≥98%
小鼠蛋白激B(PKB)试剂盒移液枪吸头正 for HPLC, ≥99.9%钩藤 分析标准品,≥98%
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)试剂盒移液枪吸头正 分析标准品鹿蹄草 分析标准品,≥98%
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)试剂盒玻璃移液管正 农残级酯蟾配 分析标准品,≥98%
小鼠血红素氧合2(HO-2)试剂盒玻璃移液管正戊烷 农残级酯蟾配 98%
NO一氧化化氮ELISA试剂盒用途:
软骨染色
注意事项:
主要由番红O染色液和分化液组成。染色时,注意分化时间,否则容易导致过染或脱色
储存条件:室温,避光,12个月