Pancreastatin胰抑制素ELISA试剂盒

产品属性：

需要而未提供的试剂和器材：

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器

6. 蒸馏水，容量瓶等。

标本要求：

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

备试剂与收集血样：

1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。

2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。

4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备：

ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

（1）血清

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（2）血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（3）尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

（4）细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

（5）培养细胞

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（6）组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

小鼠β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒 反式-可母尼，湿地松1-萘 97%橡胶翻口塞 24#

小鼠肝脂(HL)试剂盒 灵芝S苯 97%优质橡胶管(真空管) 6*11,5KG

小鼠肝脂(HL)试剂盒 灵芝萜二2-噻吩 98%电磁式空气泵ACO-003

小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)试剂盒 6-(beta-D-吡喃葡萄糖氧)水杨酯3-乙酰苯 98%长不锈钢刮刀 3.0mm

小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)试剂盒 1-咖啡酰奎宁3-氨苯频呐酯 97%坩埚 TS-021 200ml

小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)试剂盒 DL-薄荷4-乙酰氧苯频呐酯 97%茄形烧瓶 1 L/24#

小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)试剂盒 防己诺林; 粉防己乙素; 汉防己乙素; 去粉防己4-氨苯盐盐 97%茄形烧瓶 2 L/24#

小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)试剂盒 (+)-花旗松素3-氨-4- 98%茄形烧瓶 3 L/29#

小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)试剂盒 双去氧姜黄素2-蒽 97%四氟搅拌塞头 24#

小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)试剂盒 七叶胆皂甙9-蒽 99%四氟搅拌塞头 29#

小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)试剂盒 Cuniloside B2-嘧啶-5-频哪酯 96%帆布手套

小鼠二氧化(DAO)试剂盒 异木香酯4-苄氧-3-氟苯 98%封口膜 parafilm

小鼠二氧化(DAO)试剂盒 9-羟-13E-赖百当烯-15-2-苄氧苯 96%T型四氟三通接头 24#

小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂盒 野马追内酯K2-联苯 97%塑料洗瓶 500ml

小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂盒 梓甙4-苄氧苯  97%橡皮筋

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)试剂盒 异八角3,5-双（三氟）苯 97%干燥器  300mm
Pancreastatin胰抑制素ELISA试剂盒用途：

细胞学样本常规染色，尤其适用于妇科细胞学涂片染色、细胞脱落标本染色。

注意事项：

巴氏染色液是用、橙黄、磷钨等配制而成，用于处理分泌物等细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。

储存条件：室温，12个月

操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。