PP胰多肽ELISA试剂盒

标本要求：

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

产品属性：

需要而未提供的试剂和器材：

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器

6. 蒸馏水，容量瓶等。

备试剂与收集血样：

1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。

2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。

4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备：

ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

（1）血清

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（2）血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（3）尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

（4）细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

（5）培养细胞

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

（6）组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

小鼠白介素3(IL-3)试剂盒13111000.149/10-100ul手动单道移液器(Eppendorf)4-氟-3-苯 98%叶绿素镁钠盐

小鼠白介素4(IL-4)试剂盒13111000.157/20-200ul手动单道移液器(Eppendorf)4-氟-3-氧苯 98%肉桂 CP，98%

小鼠白介素4(IL-4)试剂盒13111000.165/100-1000ul手动单道移液器(Eppendorf)4-氟-2-三氟 98%肉桂 AR，99%

小鼠白介素-5(IL-5)试剂盒13111000.173/500-5000ul手动单道移液器(Eppendorf)4-氟-3-(三氟)苯 98%肉桂 98%

小鼠白介素-5(IL-5)试剂盒0.5-10ul手动八道移液器(Eppendorf)5-氟-2-羟苯 97%肉桂 ≥99.0%, FG

小鼠层连蛋白/板层素(LN)试剂盒10-100ul手动八道移液器(Eppendorf)2-氟吡啶-4- 95%肉桂 98%

小鼠层连蛋白/板层素(LN)试剂盒30-300ul手动八道移液器(Eppendorf)5-氟吡啶-3- 98%3,5-二氧肉桂，主要为反式 99%

小鼠巨噬集落激因子(M-CSF)试剂盒0.5-10ul手动十二道移液器(Eppendorf)2-氟吡啶 99%2,6-二肉桂 96%

小鼠巨噬集落激因子(M-CSF)试剂盒10-100ul手动十二道移液器(Eppendorf)3-羟 97%3,3-二苯-1- 98%

小鼠巨噬来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒30-300ul手动十二道移液器(Eppendorf)4-羟 97%醋去氢表雄 98%

小鼠巨噬来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒SLGP033RS/33mm,0.22u一次性针头式滤器(Millipore)4-异喹啉盐盐 98%乙 98%

小鼠正常T表达和分泌因子(RANTES/CCL5)试剂盒 SLMP025SS/25mm,0.22u一次性针头式滤器(Millipore)4-异苯 98%3,4-二氧肉桂 97%

小鼠正常T表达和分泌因子(RANTES/CCL5)试剂盒 SLHV033RB/33mm,0.45u一次性针头式滤器(Millipore)3-异氧苯 97%4-(二氨)肉桂 98%

小鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒IPVH00010/PVDF膜转印膜[疏水膜,膜孔径0.45um] 13.5*15cm (Millipore[分])4-异喹啉 97%3，3-二苯 99%

小鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒IPVH00010/PVDF膜转印膜[疏水膜,膜孔径0.45um] 26.5cm*3.75m(Millipore)2-异氧-4,4,5,5-四-1,3,2-二氧杂烷 98%癸乙酯 99%

小鼠催产素(OT)试剂盒 PM996/封口膜[4IN*125FT] 10cm*38m(Cole-parmar)异 97%苯雌二 98%
PP胰多肽ELISA试剂盒用途：

用于网织红细胞活体染色

注意事项：

背景清楚，颜色鲜亮

储存条件：室温，避光，12个月