BT-549细胞

产品名称：乳腺导管癌细胞；BT-549
英文简称：BT-549细胞

货号：LZ-X968515
规格：T25
生长特性：贴壁生长

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，公司产品仅用于科研超低比价，产品货期短，价格优，售后齐全。

冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的*冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型*冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低  1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

实验材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml灭菌烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 
4、灭菌培养皿1个，细胞培养瓶1个 
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 
6、细胞计数板1块； 
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 
8、酒精灯1台；

实验报告：
一、分离与培养：
   1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
   3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
   5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
   1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
   2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
   5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
   6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微
镜下观察图像并拍照。

注意事项：
     尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
     如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
     染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
     如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
     荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
     用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
     需自备PBS。
     本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
     为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4-正丁联苯多根硬皮马勃（可）拉丁属名: Enterobacter agglomerans Ewing and Fife

Saracatinib (AZD0530)成团肠杆菌(成团泛菌)拉丁属名: Metschnikowia reukaufii

3,5-二叔丁拉考夫梅奇酵母拉丁属名: Empedobacter brevis

3,5-二叔丁短稳杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二苯-2-吡啶膦绿木霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二苯-2-吡啶膦松口蘑用途: 分类 研究

3-(三硅烷)炔溴枯草芽胞杆菌拉丁属名: Pichia membranifaciens

3-(三硅烷)炔溴膜醭毕赤酵母拉丁属名: Lactarius picinus

3-(三硅烷)炔溴黑乳菇拉丁属名: Acinetobacter johnsonii

Tenovin-1约氏不动杆菌拉丁属名: perfringens Type C

4-氨四氢吡喃产气荚膜梭菌 素C型拉丁属名: Massilia plicata

4-氨四氢吡喃折叠马赛菌拉丁属名: Escherichia coli

4-(Boc-氨)苯大肠埃希氏菌拉丁属名: Absidia coerulea

4-(Boc-氨)苯蓝色犁头霉拉丁属名: Pseudomonas mandelii

2-氨酰苯聚贪噬菌拉丁属名: Bacillus thuringiensis

B-氧-9-BBN苏云金芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
BT-549细胞兔金属硫蛋白3 (MT3)酶联免疫吸附测定试剂盒硫铥(III) 八水合物意大利青霉拉丁属名: Paraliobacillus quinghaiensis

兔雌激素受体β(ERβ)酶联免疫吸附测定试剂盒 二二氨钯青海海境芽孢杆菌拉丁属名: Streptomyces rectiviolaceus

兔唾液(SA)酶联免疫吸附测定试剂盒 二二氨钯直丝紫链霉菌拉丁属名: Lactobacillus plantarum

兔抗性磷酶(ACP5)酶联免疫吸附测定试剂盒二二氨钯植物乳杆菌拉丁属名: Streptomyces ansochromogenes var. pallens

兔鸟苷环化酶激活因子2A(GUCA2A)酶联免疫吸附测定试剂盒 (S)-(-)-2-氨-2'-羟-1,1'-联萘圈卷产色链霉菌浅色变种用途: 研究

兔单核趋化蛋白3(MCP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒3,3,5,5-四二苯二硫 pGFP4412注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

兔磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)酶联免疫吸附测定试剂盒 3,3,5,5-四二苯二硫球色单隔孢属拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

兔可溶性糖蛋白130(sgp130)酶联免疫吸附测定试剂盒4--6,7-二氧喹唑啉酿酒酵母拉丁属名: Bacillus atrophaeus Nakamura

兔硫乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶联免疫吸附测定试剂盒6,7-二氧-3H-喹唑啉-4-用途: 进行分析检测及抗病性鉴定，指导生产。

兔P62抗体(AP62A)酶联免疫吸附测定试剂盒6,7-二氧-3H-喹唑啉-4-*灰葡萄孢用途: 研究 教学 生产

兔巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶联免疫吸附测定试剂盒Mozavaptan假单胞菌拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

兔肽聚糖识别蛋白S(PGRP-S)酶联免疫吸附测定试剂盒 化铽,六水酿酒酵母用途: 产生四烯类抗菌素，能防治棉花苗期病害，可作抗生菌肥料的形式施用于土壤

兔色素上皮衍生因子(PEDF)酶联免疫吸附测定试剂盒化铽,六水龟裂链霉菌拉丁属名: Chryseobacterium  carnis

兔失调症蛋白质2(ATXN2)酶联免疫吸附测定试剂盒2-异氧苯金黄杆菌属拉丁属名: Corynebacterium ammoniagenes

兔胆固调节元件结合蛋白(SREBP)酶联免疫吸附测定试剂盒5-苯-2-糠产氨棒杆菌拉丁属名: Bacillus horikoshii

兔触珠蛋白相关蛋白(HPR)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-苯-2-糠堀越氏芽孢杆菌拉丁属名: Candida  utilis