CHO-K1细胞

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产品名称：中国仓鼠卵巢细胞；CHO-K1
英文简称：CHO-K1细胞

货号：LZ-X968321
规格：T25
生长特性：贴壁生长

冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的*冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型*冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低  1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个； 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；

实验报告：
一、分离与培养：
   1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
   3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
   5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
   1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
   2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
   5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
   6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

UMNSAH/DF-1细胞    鸡胚胎成纤维细胞；UMNSAH/DF-1    T25    成纤维母细胞样    贴壁生长    DMEM(高糖）+10%FBS（gibco）    1：2传代

Duckembryo细胞    鸭子胚胎成纤维细胞；Duckembryo    T25    成纤维母细胞样    贴壁生长    FM培养基    1：2传代

CNE2细胞    鼻咽癌细胞；CNE2    T25    上皮细胞样    贴壁生长    1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鳞癌组织；原代细胞胰蛋白酶消化，48小时开始生长，传代20天。裸鼠体内移植100%成瘤。    RPMI1640+10%bovinecalfserum    1：2传代

CNE细胞    鼻咽癌细胞；CNE    T25    上皮样    贴壁生长    此细胞株来源于一位58岁女性鼻咽癌患者。    RPMI1640+10%FBS    消化CQ-5分钟。1:2。3天内可长满。

NCI-H716细胞    结直肠腺癌细胞；NCI-H716    T25    上皮细胞样    悬浮生长，聚团，少数贴壁    从一位经5-氟尿嘧啶治疗的患者腹水中得到的细胞建立了这个细胞株。 与其它结直肠癌细胞系不同，这株细胞有多巴脱羧酶，细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒。 这株细胞不表达TAG-72 或CA19-9抗原，也不生成癌胚抗原（CA-A）    RPMI1640+10%FBS    1:3～1:6传代，每周换液2～3次

LS174T细胞    结直肠腺癌细胞；LS174T    T25    上皮样    贴壁生长    LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代，象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CA-A)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性，但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因CS-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。
   DMEM(高糖）+10%FBS    1：2传代

COLO320HSR细胞    结直肠腺癌细胞；COLO320HSR    T25    半贴壁生长    该细胞1984年建系，源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fu治疗后的腹水。    RPMI1640+10%FBS    1:2。3天内可长满。

COLO320DM细胞    结直肠腺癌细胞；COLO320DM    T25    圆形的并能折光的    半贴壁生长    该细胞可产生5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、ACTH和甲状旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱阳性    RPMI1640+10%FBS    1:2。3天内可长满。

DLD-1细胞    结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1    T25    上皮细胞样    贴壁生长    DLD-1是1977-1979年间D.L.Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNAfingerprinting和染色体组型分析表明这株细胞与HCT-15(CCL-225)相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。他们的遗传起源可通过DNAfingerprinting证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。细胞的CSAp阴性(CSAp-)。DLD-1细胞的p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个CS->    RPMI1640+10%FBS    消化5分钟。1:2。4-5天长满。

NCI-H508细胞    结肠直肠腺癌细胞；NCI-H508[H508]    T25    贴壁生长    RPMI1640+10%FBS    1：2传代

HCT/Taxo1细胞    结肠癌紫衫醇耐药株    T25    上皮样    贴壁生长    RPMI-1640    1：2传代

HCT-8/V细胞    结肠癌长春新碱耐药株    T25    上皮样    贴壁生长    RPMI-1640    1：2传代

SW620细胞    结肠癌细胞；SW620    T25    上皮样    贴壁生长    SW620是从一个51岁男性白人组织中分离得到。由A.Leibovitz等从一个淋巴结建株。细胞系主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成。它仅合成少量癌胚抗原（CA-A）且在裸鼠中有高度的致瘤性    DMEM(高糖）+10%FBS    1:3传代，2-3天换液一次

SW480细胞    结肠癌细胞；SW480    T25    上皮样    贴壁生长    SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp和直肠抗原3阴性；角蛋白阳性；p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代；细胞p53蛋白表达水平升高；癌基因CS-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性；未检测到癌基因N-myc的表达；不表达Matrilysin（一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶）。    L15: Leibovitz Medium  10%FBS　 无二氧化碳培养    1:2传代，CQ-E2天换液一次

LOVO细胞    结肠癌细胞;LOVO    T25    上皮样    贴壁生长    LoVo建自1971年，从诊断为结肠腺癌的56岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。癌基因CS-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。它在裸鼠中能成瘤。与107细胞联合皮下接种５只裸鼠21天后全部成瘤。表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CCS-3和CCS-4。    F12K+10%FBS    1:3传代，2-3天换液一次

HT-29细胞    结肠癌细胞；HT-29    T25    上皮样    贴壁生长    该细胞是1964年由FoghJ用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来，已建株的培养细胞用含血清的McCoy's5a培养基培养。该细胞系在裸鼠中成瘤，也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CA-A、TGFβ结合蛋白和黏液素；表达尿激酶受体，但没有检测到血浆酶原活性；不表达CD4，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺（HIV的可能替代受体）。该细胞系癌基因CS-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性；p53基因过表达，并且在273位密码子处发    DMEM（高糖）+10%FBS    1：2传代

HCT-8细胞    结肠癌细胞；HCT-8    T25    上皮样    贴壁生长    该细胞角蛋白阳性；表达CA-A、碱性磷酸酶；与HRT-18为同一细胞。     RPMI1640+10%FBS    1:3传代，2-3天换液一次

HCT-15细胞    结肠癌细胞；HCT-15    T25    上皮样    贴壁生长    DNA fingerprinting证据表明，这株细胞和DLD-1(ATCC CCL-221,人结直肠腺癌)来源于同一个人；但同工酶及细胞染色体组型分析仍存疑问；细胞呈CSAp阴性(CSAp-)；角蛋白阳性。     RPMI1640+10%FBS    1：2传代

HCT-116细胞    结肠癌细胞；HCT-116    T25    上皮样    贴壁生长    HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮样的肿瘤    McCOY's5A+10%FBS    1:3传代，CQ-4天换液一次

COLO205细胞    结肠癌细胞；COLO205    T25    悬浮    该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的。该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4~6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性；产生CA-A、IL10。    RPMI1640+10%FBS    1：2传代

Caco2细胞    结肠癌细胞；Caco2    T25    上皮样    贴壁生长    此细胞株分离自一个原发性结肠癌。当细胞长满时，表现出典型的肠细胞分化的特征。Caco-2细胞表达维生素A酸结合蛋白I和视黄醇结合蛋白II，角蛋白阳性。    RPMI1640+10%FBS    1：2传代

RKO细胞    结肠癌细胞（低分化）；RKO    T25    上皮样    贴壁生长    RKO是一个低分化的结肠癌细胞系。RKO细胞含有野生型P53，但缺乏人甲状腺受体核受体(h-TRbeta1)。RKO细胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6细胞。RKO细胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的亲本细胞系。该细胞系在裸鼠中成瘤，且在软琼脂中形成集落。    DMEM(高糖）+10%FBS    消化CQ-5分钟。1:2。3天内可长满。

HCT/FU细胞    结肠癌氟尿嘧啶耐药株    T25    上皮样    贴壁生长    RPMI-1640    1：2传代

核受体亚家族3C组成员1ELIS检测A试剂盒    Nuclear Receptor Subfamily 3, Group C, Member 1

利什曼病ELIS检测A试剂盒    leishmaniasis

类风湿因子IgM抗体ELIS检测A试剂盒    rheumatoid factor IgM

类风湿因子IgA抗体ELIS检测A试剂盒    rheumatoid factor IgA

类风湿因子IgG抗体ELIS检测A试剂盒    rheumatoid factor IgG

布鲁东氏酪氨酸激酶ELIS检测A试剂盒    Bruton'S Tyrosine Kinase

肺炎衣原体IgG抗体ELIS检测A试剂盒    Chlamydiapneumoniae IgG

肺炎衣原体IgM抗体ELIS检测A试剂盒    Chlamydiapneumoniae IgM

抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体ELIS检测A试剂盒    myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody

抗新蝶呤抗体ELIS检测A试剂盒    Neopterin antibody

细粒棘球绦虫粪IgG抗体ELIS检测A试剂盒    Echinococcus granulosus IgG

细粒棘球绦虫粪IGM抗体ELIS检测A试剂盒    Echinococcus granulosus IGM

维生素D结合蛋白1ELIS检测A试剂盒    Vitamin D-binding protein 1

诱导骨髓白血病细胞分化蛋白Mcl-1ELIS检测A试剂盒    Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1

肌骨素ELIS检测A试剂盒    Myostatin

3-甲氧基去甲肾上腺素ELIS检测A试剂盒    3-normetanephrine

3-甲氧基肾上腺素ELIS检测A试剂盒    3-metanephrine

血小板内皮细胞聚集受体 1ELIS检测A试剂盒    Platelet endothelial aggregation receptor 1

冠蛋白1CELIS检测A试剂盒    Coronin 1C

CHO-K1细胞硒磷酸合成酶1ELIS检测A试剂盒    selenophosphate synthetase I

乙酰辅酶A羧化酶合成酶ELIS检测A试剂盒    acetyl-CoA carboxylase synthetase

维甲酸ELIS检测A试剂盒    Tretinoin

组蛋白去乙酰化酶2ELIS检测A试剂盒    Histone Deacetylase 2

组蛋白去乙酰化酶3ELIS检测A试剂盒    Histone Deacetylase 3    
注意事项：
     尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
     如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
     染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
     如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
     荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
     用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
     需自备PBS。
     本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
     为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。