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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-Phospho-cdc25C (Thr48)
中文名称 磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体价格
别 名 CDC 25; Cdc 25C; CDC25; Cell division cycle 25 homolog C; Cell division cycle 25C; Cell division cycle 25C protein; Dual specificity phosphatase Cdc25C; M phase inducer phosphatase 3; Mitosis inducer CDC25; MPIP3; Phosphotyrosine phosphatase.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞周期蛋白 转录调节因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human cdc25C around the phosphorylation site of Thr48
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
兔质金属蛋白酶17(MMP-17)酶联免疫吸附测定试剂盒3-(三硅炔)噻吩屎肠球菌拉丁属名: Bacillus pumilus
兔异常凝血酶原(APT)酶联免疫吸附测定试剂盒 吡喃葡糖蔗糖短小芽孢杆菌 更名不慌供应拉丁属名: Hainesia lythri
兔生长分化因子2(GDF2)酶联免疫吸附测定试剂盒4'-(4-氧苯)-2,2':6',2''-三吡啶绒边胶盘孢拉丁属名: Phomopsis longicolla Hobbs
兔III型前胶原氨端原肽(PIIINP)酶联免疫吸附测定试剂盒氧化锗大豆拟茎点种腐病菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
兔腺苷脱氨酶(ADA)酶联免疫吸附测定试剂盒 蒽醌-2-磺钠盐杏鲍菇拉丁属名: Pleurotus pulmonarius
兔生长调节致癌因α(GROα/CXCL1/NAP3)酶联免疫吸附测定试剂盒 蒽醌-2-磺钠盐肺形侧耳拉丁属名: Escherichia coli
兔肝素因子4抗体(HPF4)酶联免疫吸附测定试剂盒蒽醌-2-磺钠盐大肠埃希氏菌拉丁属名: Bacillus subtilis
兔血管紧张素转化酶2(ACE2)酶联免疫吸附测定试剂盒 氢氧化锶 八水合物枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
兔α-黑色素激素(αMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒 氢氧化锶 八水合物枯草芽孢杆菌拉丁属名: Rhodotorula minuta
兔诱导型一氧化氮合酶(NOS2/iNOS)酶联免疫吸附测定试剂盒氢氧化锶 八水合物小红酵母拉丁属名: Bacillus subtilis
兔α2抗纤溶酶(α2-AP)酶联免疫吸附测定试剂盒 2,6-二氨蒽醌枯草芽孢杆菌拉丁属名: Arthrobacter globiformis
兔质金属蛋白酶7(MMP-7)酶联免疫吸附测定试剂盒邻苯二二酯球形节杆菌用途: 酱油生产菌
兔原钙黏素15(PCDH15)酶联免疫吸附测定试剂盒 邻苯二二酯米曲霉拉丁属名: Staphylococcus caprae
兔瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒5-硝-2-山羊葡萄球菌拉丁属名: Candida krusei
兔ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1元4(ADAMTS4)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-硝-2-克鲁斯假丝酵母拉丁属名: Aspergillus awamori
兔Dickkopf 相关蛋白2(DKK2)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-硝-2-泡盛曲霉拉丁属名: Hymenobacter sp.
磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体价格兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白
兔红膜蛋白(EMP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白
兔巨噬集落激因子受体(MCSFR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Beta catenin, Beta-Cat ELISA Kit 人β连环蛋白/联蛋白
兔V-Myc骨髓瘤病癌因同源物(MYC)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Beta amyloid precursor protein, BetaAPP ELISA Kit 人淀粉样前体蛋白
兔信号传导转录激活因子5A(STAT5A)酶联免疫吸附测定试剂盒Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit 人β2糖蛋白
兔白介素3介导核因子(NFIL3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白
兔τ-蛋白激酶1(τPK1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸
兔神经丝蛋白3(NEF3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白