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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CK19
中文名称 细胞角蛋白19抗体说明书
别 名 CK-19; CK 19; 40 kDa keratin intermediate filament; CK 19; ck19; Cytokeratin 19; k19; k1cs; Keratin 19; Keratin type I 40 kD; Keratin type i 40kD; Keratin type I cytoskeletal 19; krt19; mgc15366.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg 1ml/1mg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 干细胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK19 C-terminus
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
兔微管关联蛋白(MAPτ)酶联免疫吸附测定试剂盒2-氧-5-酚奥氏蜜环菌拉丁属名: Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn
兔骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)酶联免疫吸附测定试剂盒茴香偶姻枯草芽孢杆菌拉丁属名: Haladaptatus paucihalophilus
兔16α羟雌1(16-α OHE-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 茴香偶姻嗜低盐适盐菌拉丁属名: Hansenula anomala var. anomala
兔白介素9(IL-9)酶联免疫吸附测定试剂盒1-(2,3-二)哌盐盐异常汉逊酵母异常变种拉丁属名: Phycomyces nitens
兔神经调节蛋白4(NRG-4)酶联免疫吸附测定试剂盒1-(2,3-二)哌盐盐闪光须霉拉丁属名: Rhizopus arrhizus var. tonkinensis
兔上皮膜抗原(EMA)酶联免疫吸附测定试剂盒 1-(2,3-二)哌盐盐少根根霉东京变种拉丁属名: Aspergillus niger
兔β2糖蛋白(β2-GP)酶联免疫吸附测定试剂盒 2,6-吡啶二黑曲霉用途: 研究
兔低氧上调节因子1(HYOU1)酶联免疫吸附测定试剂盒 2,6-吡啶二麦根腐平脐蠕孢拉丁属名: Issatchenkia orientalis
兔可溶性转铁蛋白受体1(sTfR1)酶联免疫吸附测定试剂盒PF-3845东方伊萨酵母用途: 与大豆共生固氮
兔补体因子I(CFI)酶联免疫吸附测定试剂盒1,2,3,4-四氢萘(THN)大豆慢生根瘤菌用途: 固氮。
兔糖链抗原19-9(CA19-9)酶联免疫吸附测定试剂盒 异喹啉毛相思根瘤菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
兔双上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)酶联免疫吸附测定试剂盒异喹啉高山被孢霉拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
兔早期生长应答蛋白1(EGR1)酶联免疫吸附测定试剂盒2-羟喹喔啉酿酒酵母拉丁属名: Cerrena unicolor
兔晶状体蛋白αB (CRYαB)酶联免疫吸附测定试剂盒2-羟喹喔啉单色下皮黑孔菌拉丁属名: Escherichia coli
兔轴突生长诱向因子1(Ntn1)酶联免疫吸附测定试剂盒吲哚-5-大肠埃希氏杆菌拉丁属名: Paenibacillus contaminans
兔角化内分泌因子(KAF)酶联免疫吸附测定试剂盒吲哚-5-类芽孢杆菌属拉丁属名: Nonomuraea dietziae
细胞角蛋白19抗体说明书兔蛋白酪氨酸磷酸酶受体O(PTPRO)酶联免疫吸附测定试剂盒CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit 人素
兔突触体相关蛋白25(SAP25)酶联免疫吸附测定试剂盒Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit 人α突触核蛋白
兔生长因子受体结合蛋白14(Grb14)酶联免疫吸附测定试剂盒CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit 人糖链抗原19-9
兔抗钙调素特异抗体(CAM-Ab)酶联免疫吸附测定试剂盒 HRD(Human Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素
兔性别决定区Y框蛋白18(SOX18)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 人他克莫司
兔白共同抗原(LCA/CD45)酶联免疫吸附测定试剂盒ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit 人上皮特异性抗原
兔集聚蛋白(AGRN)酶联免疫吸附测定试剂盒 EMA(Human Epithelial membrane antigen) ELISA Kit 人上皮膜抗原
兔白调节素(LR)酶联免疫吸附测定试剂盒 CLU(Human clusterin) ELISA Kit 人凝聚素