品牌 | 其他品牌 | 货号 | LZ-E028983 |
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标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
产品属性:
产品名称 | SmIg细胞膜表面免疫球蛋白ELISA试剂盒 |
英文名称 | SmIg ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E028983 |
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
Ⅷ(F8)联免疫吸附测定试剂盒 十六烷三化铵 ACS, 99.0-100.5% 3, 3-二氧酯 97%
增殖相关蛋白2G4 (PA2G4)联免疫吸附测定试剂盒十六烷三化铵氢氧化钠 CP,95%3-硝水杨酯 98%
Ⅰ型胶原α1(COL1α1)联免疫吸附测定试剂盒 十六烷二乙三乙烯 AR,99.0%蟾蜍素 99%
VI型胶原α3(COL6α3)联免疫吸附测定试剂盒 十六烷二乙三乙烯 >99.5%(GC)N-琥珀酰亚-N-氨酯 97%
XIII型胶原 (COL13)联免疫吸附测定试剂盒十六烷二乙三乙烯 光谱纯, ≥99.5% (GC)(S)-(-)-1, 2, 4-丁三 98%
XIV型胶原 (COL14)联免疫吸附测定试剂盒十八烷三四 AR,99.0%4-羟乙酰乙内酯 96%
III型胶原交联羧端肽(CTX-III)联免疫吸附测定试剂盒 十八烷三四 ≥99.5% (GC)2--5-吡啶 97%
EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成抗体(EJ/GlyRS)联免疫吸附测定试剂盒 十八烷三四乙烯 GR,99.5%三唑 分析标准品,99.8%
肝配蛋白A1 (EFNA1)联免疫吸附测定试剂盒十八烷三化铵三乙二 75℃+++三唑
E选择素(SELE)联免疫吸附测定试剂盒 十八烷三化铵正癸烷 99%五硫化二磷 99%,P≥27%
F-框蛋白2(FBXO2)联免疫吸附测定试剂盒 十八烷三化铵1-乙酰-4-(4-羟苯)哌 98%三异 95%
FMS样酪氨激3(Flt3)联免疫吸附测定试剂盒 十四烷三2-氨-3,4-二 98%腐植钠 CP
GATA结合蛋白1(GATA1)联免疫吸附测定试剂盒十四烷三2,8-双(三氟)-4-羟喹啉 99%腐植钠 AR
GATA结合蛋白2(GATA2)联免疫吸附测定试剂盒十四烷三5-苯酞 97%3-丁炔-1- 97%
GATA结合蛋白3(GATA3)联免疫吸附测定试剂盒十四烷三化铵2,2-二戊二 98%4-苄氧苯 98%
GATA结合蛋白4(GATA4)联免疫吸附测定试剂盒十四烷三化铵3,4-二羟 98%3-(二氨)烯乙酯 98%
SmIg细胞膜表面免疫球蛋白ELISA试剂盒用途:
在植物病虫害组织切品染色中,可将宿主植物组织中菌丝体和孢子染成红色。
注意事项:
钌红(Ruthenium Red)分子式为Ru3O2Cl6.14(NH3),CAS号为11103-72-3,分子量为786.35,外观为红色晶体,可用做电压敏感的钙离子通道抑制剂
储存条件:室温,避光,12个月