品牌 | 其他品牌 | 货号 | LZ-E029074 |
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样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
产品属性:
产品名称 | MT褪黑素ELISA试剂盒 |
英文名称 | MT ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E029074 |
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
肝生长因子受体(c-MET/HGFR)联免疫吸附测定试剂盒性茜素蓝B(还原型) 98%1,5,5-三海因 99%
RECK蛋白(RECK)联免疫吸附测定试剂盒蓝6B(还原型) 用于培养,98%十一烷酰 97%
CD44变体5(CD44v5)联免疫吸附测定试剂盒蓝6BL-(氧化型)98%十一烯酰 98%
色羟化1(TPH1)联免疫吸附测定试剂盒蓝6B0.98XTT钠盐 90%
磷化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)ELISA kit蓝6B USP级蒽 96%
类17-β-羟类固脱氢10(HSD17β10)联免疫吸附测定试剂盒偶氮膦Ⅰ铜粒 99.99% metals basis,粒径<5mm邻氨 99%
组蛋白脱乙酰1(HDAC1)联免疫吸附测定试剂盒偶氮膦Ⅲ铬粒 99.95% metals basis,1-6mm邻乙酰氨酚 99%
组织相容性复合体Ⅰ类相关因A(MICA)联免疫吸附测定试剂盒偶氮膦mA氧化铪(IV) 粉末, 98%2-氨-4-酚 98%
血管内皮生长因子(VEGF)联免疫吸附测定试剂盒偶氮膦mN硫化铅 SP邻氨对叔丁酚 98%
吻素(KISS)联免疫吸附测定试剂盒孔雀绿草盐硫化铅 99.9% metals basis,200mesh,powder邻硝对叔丁 98%
内皮糖蛋白(ENG)试剂盒孔雀绿草盐硫化铅 99.999% metals basis3,5-二酚 分析标准品
信号肽,CUB域,EGF样1 (SCUBE1)联免疫吸附测定试剂盒孔雀绿硫化铅 Pb ≥82%3,5-二 98%
一氧化氮(NO)联免疫吸附测定试剂盒 固蓝B盐化钕(Ⅲ) 99.9% metals basis联大茴香盐盐 CP,96%
氧化型(GSSG)联免疫吸附测定试剂盒固蓝B盐钐粉 99.9% metals basis,200目3,3'-二联苯 分析标准品
过氧化氢(CAT)ELISA kit固蓝B盐化钐(III),六水 99%4-乙 97%
总胆汁(TBA)联免疫吸附测定试剂盒 固蓝B盐锌粒 99.99% metals basis4-乙 99%
MT褪黑素ELISA试剂盒英文名称:Z-VAD-FMK
产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
Z-VAD-FMK是一种可渗透细胞的广谱caspase抑制剂。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
*:187389-52-2
别名:Z-VAD(OMe)-FMK;Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK
纯度:98.0%
分子量:467.49
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
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