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AOPP晚期氧化蛋白产物ELISA试剂盒

产品简介

AOPP晚期氧化蛋白产物ELISA试剂盒公司正在销售的产品:CC16(Human Clara cell protein) ELISA Kit 人克拉拉细胞蛋白规格: 48T*
HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha) ELISA Kit 人低氧诱导因子1α规格: 48T*
MC Ab(Human melanocyte

更新时间:2022-05-30
访问次数:373

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PRODUCT CLASSIFICATION

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产品属性:

产品名称

AOPP晚期氧化蛋白产物ELISA试剂盒

英文名称

AOPP ELISA Kit

产品规格

48T/96T

产品货号

LZ-E029058

需要而未提供的试剂和器材:

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器

6. 蒸馏水,容量瓶等。

标本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

备试剂与收集血样:

1.  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。

2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4.  洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)


QQ截图20200429162339.jpg

检测程序:

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备:

ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1)血清

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4)细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5)培养细胞

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6)组织标本

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

血小板因子4(PF4)联免疫吸附测定试剂盒异硫玫瑰红B4'-乙 99%维B6 99%

血小板因子4变种1(PF4V1)联免疫吸附测定试剂盒亚蓝二氢芳樟 95%Amberlyst® 15离子交换树脂 湿

血型糖蛋白E(GYPE)联免疫吸附测定试剂盒亚蓝麦芽酚 99%Amberlyst® 15离子交换树脂 干

受体4(SSTR4)联免疫吸附测定试剂盒亚蓝二苯 CPAmberlite® IRA-900 阴离子交换树脂

烟酰腺嘌呤二核磷(NADPH)联免疫吸附测定试剂盒 亚蓝二苯 99%717强性I型阴离子交换树脂 AR

烟酰腺嘌呤二核磷氧化1(NOX1)联免疫吸附测定试剂盒四溴酚兰二苯 99.5%,升华纯化732强苯乙烯阳离子交换树脂 AR

烟酰腺嘌呤二核磷氧化4(NOX4)联免疫吸附测定试剂盒四溴酚兰琼脂粉 灰分ash ≤1.5%,High gel strength(1000-1200 g/cm2)AMBERLITE IRA402 CL阴离子交换树脂 型

烟酰腺嘌呤二核磷氧化5(NOX5)联免疫吸附测定试剂盒伊文斯蓝灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(700-900 g/cm2)蒿 分析标准品,≥98%

延伸蛋白A(EloA)联免疫吸附测定试剂盒 伊文斯蓝琼脂 BR蒿 98%

抗氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)联免疫吸附测定试剂盒 伊文斯蓝α-淀粉 BR 98%

受体3(SSTR3)联免疫吸附测定试剂盒硝化四氮唑蓝耐高温α-淀粉 BR0.98

胰蛋白(TRY)联免疫吸附测定试剂盒 硝化四氮唑蓝酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养 BR辅Q10 98%

胰蛋白原II(Try2)联免疫吸附测定试剂盒 硝化四氮唑蓝性琼脂 BR去氢表雄 99%

胰蛋白原激活肽(TAP)联免疫吸附测定试剂盒化硝四氮唑蓝琼脂 BR多烯紫杉 98%

胰岛素原(PI)联免疫吸附测定试剂盒化硝四氮唑蓝乙酰培养 BR 95%

胰淀粉α2(AMY2)联免疫吸附测定试剂盒 化硝四氮唑蓝叠氮化物葡萄糖液态培养 BR石杉 分析标准品
AOPP晚期氧化蛋白产物ELISA试剂盒英文名称:Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit

产品规格:100T

形态学检测是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起初,细胞间连接和微绒毛消失,细胞体积缩小,胞浆凝缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成一个个空泡,核糖体与线粒体等细胞器聚集,结构尚无明显改变,细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂成碎块,此时细胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不断出芽、脱落,一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体:后凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化,可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。

计算细胞凋亡率和死亡率:

细胞凋亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%

细胞死亡率=坏死细胞/细胞总数×100%

储存:RT,避光,有效期12个月。

操作步骤:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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