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PCR扩增实验试剂盒

PCR扩增实验试剂盒

产品简介:化氢酶(牛肝脏)Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb3,二溴噻吩

他唑巴坦,他唑巴坦酸Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb2,5-二溴噻吩

他唑巴坦(标准品)PHF2 (D45A2) Rabbit mAb2-甲基-2-戊酸

NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水

产品型号:50T

浏览次数:67

更新时间:2021-03-15

产品厂地:上海市

详情介绍
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组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 PCR扩增实验试剂盒

 规格

 50T

 货号

 LZP7909

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
苏拉明钠MSK1 (C27B2) Rabbit mAb四丁基溴化

弹性蛋白酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb苄基-1-哌碳酸酯

脂肪酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb5-吡啶-2-

木聚糖酶Phospho-CrkII (Tyr221) Antibody5-溴-2-吡啶甲

透明质酸,玻尿酸(分子量80万-150万)PD-1 (D7D5W) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氟吡啶-2-

透明质酸,玻尿酸,醣酸(分子量3K)CrkII Antibody氨基-5-甲基吡唑

透明质酸,玻尿酸,醣酸(分子量10K)RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb(2-甲基)三基溴化膦

透明质酸,玻尿酸,醣酸(分子量90K)RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb苄基哌啶

透明质酸,玻尿酸,醣酸(分子量4K)EA/UBXD8 (D8H6D) Rabbit mAb2-三氟甲酰

罗哌卡因Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb活性二氧化锰

罗哌卡因(标准品)Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb环氧溴烷

醋酸棉酚Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,二溴噻吩

过氧化氢酶(牛肝脏)Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb3,二溴噻吩

他唑巴坦,他唑巴坦酸Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb2,5-二溴噻吩

他唑巴坦(标准品)PHF2 (D45A2) Rabbit mAb2-甲基-2-戊酸

NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水合物PHF2 (D45A2) Rabbit mAb甲基-羟甲基氧杂环丁烷

NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水合物Bcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)D(+)-10-樟脑磺酸

β-NADP;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸酸;氧化型辅酶 IIBcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)溴嘧啶

胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒S100A1  S100A1100 ul

胱硫-γ-裂解酶(CSE)ELISA试剂盒S100A13  S100A1320 ul

胱硫β-合酶(CBS)ELISA试剂盒SAMDC  S-腺苷蛋氨酸脱羧酶1 Kit

瓜氨酸ELISA试剂盒S100-A8/MRP8  S100A8100 ul

固调节元件结合蛋白1C(SREBP-1C)ELISA试剂盒S100-A9/MRP14/CFAG  S100A9100 ul

固调节元件结合蛋白1A(SREBP-1A)ELISA试剂盒Shrimp tropomyosin  南美白对虾过敏原蛋白(虾原肌球蛋白)100 ul

骨织素(Ostn)ELISA试剂盒SAP-1/Synaptophysin  突触相关蛋白-1/突触素100 ul

骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒SARS putative orflab polyproin   100 ul

骨形态形成蛋白拮抗蛋白ELISA试剂盒SARS S-proin  兔抗表面S蛋白100 ul
PCR扩增实验试剂盒锚蛋白重复结构域蛋白50抗体Camptothecin中文名:喜树碱别名:分子式:C20H16N2O4

氢离子转运ATP合成酶6G抗体Vindorosine中文名:别名:16-Demethoxyvindoline分子式:C24H30N2O5

锚蛋白重复结构域蛋白26抗体Cytochalasin D中文名:细胞松弛素D别名:Zygosporin A分子式:C30H376

铁蛋白Fe65抗体4,R-ajmalicine N-oxide中文名:别名:分子式:C21H24N2O4

锚定蛋白B抗体Vasicine中文名:鸭嘴花酮碱别名:分子式:C11H10N2O2



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