高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Barbituric acidFmoc-Tyr(tBu)-OPfp 98.5%甲酸甲酯 95%

Parafuchsin hydrochlorideFmoc-O-磷酸基-L-酪氨酸 98%甲酸甲酯 分析标准品,≥99.8% (GC)

Nitroso R saltFmoc-Tyr(PO<SUB>3</SUB>Bzl<SUB>2</SUB>)-OH 98.5%甲酸甲酯 99%,光谱纯

DithizoneFMOC-L-缬氨酸五氟苯酯  98.0%甲酸甲酯 99%

CurcuminFMOC-L-苯氨酸五氟苯酯  96%结晶四氯化锡  99.995% metals basis

Fast Violet B SaltN-甲酰-DL-色氨酸 98%2-甲氧基萘  98%

4-Dimethylamibenzal rhodanineN-Fmoc-N'-Boc-L-2,3-二氨基酸   97%2-氨基-1,3- 98%

DNSClFmoc-D-3-(1-萘基)氨酸 ≥98.5%丝氨盐酸盐 98%

1-NaphthylamineFmoc-3-(1-萘基)-L-氨酸 98%2,6-二氯-4-氨基苯酚 98%

Nuclear fast redFmoc-3-(2-萘基)-D-氨酸 98%邻氨基苯酚 98%

Chrome Blue KFmoc-3-(2-萘基)-L-氨酸 98%3-氨基-4-羟基苯甲酸 97%

 Ammonium metavanadateFMOC-D-3-(3-吡啶基)-氨酸 98%邻氨基对叔丁基酚 98%

1,8-ANSFmoc-L-瓜氨酸 98%苯甲酰 98%

DMTDFmoc-3-L-氨基丁酸 98%2-(溴甲基)萘 98%

Oracet blue B(3S)-3-(芴甲氧羰基氨基)-5-氧代-5-(三苯甲基氨基)戊酸 96% 2,5-二苯基噁唑 99%, 闪烁级

Calconcarboxylic acidFmoc-L-β-谷氨酸-5-叔丁基酯   98%2，6-二氯-4-酚 98%

四甲基硫酸氢铵(离子色谱级,≥99.0%(T))α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)Mouse Anti-Bov IgG/Cy5  Cy5标记的小鼠抗牛IgG

三乙胺(LC-MS淋洗剂,≥99.5%(GC))Drosha (D30F3) Rabbit mAbMouse Anti-Bov IgG/Cy3  Cy3标记的小鼠抗牛IgG

四乙基溴化铵(离子对色谱级)MeCP2 (D4F3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)Mouse Anti-Bov IgG/Bio  生物素标记的小鼠抗牛IgG

四丁基化铵(离子对色谱级)eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAbMouse Anti-Bov IgG/APC  APC标记的小鼠抗牛IgG

三辛胺(离子对试剂)eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAbMouse Anti-Bov IgG/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗牛IgG

甲酸钠(for HPLC,≥99.0%(NT))eIF3H (D9C1) XP® Rabbit mAbMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的小鼠抗牛IgG

1-己烷磺酸钠(离子对色谱级,>98.0%(T))HIF-1β/ARNT (C15A11) Rabbit mAbMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗牛IgG

高氯酸钠，无(for HPLC,99.0%)Acetyl-Histone H2B (Lys20) (D7O9W) Rabbit mAbMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的小鼠抗牛IgG

四甲基溴化铵(离子对色谱级,≥99.0%(AT))Atg3 AntibodyMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗牛IgG

三溴(光谱级,>99.0%(GC))Atg3 AntibodyMouse Anti-Bov IgG  小鼠抗牛IgG
高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒规格肝细胞粘附分子抗体ent-16β,17-Dihydroxykauran-19-oic acid中文名：别名：分子式：C20H32O4

禽流感H5亚型全病毒抗体9-Hydroxy-13E-labden-15-oic acid中文名：别名：分子式：C20H34O3

17-β-羟脱氢酶6抗体Scutebata G中文名：别名：分子式：C40H419

组胺受体H2抗体Carsol中文名：鼠尾草酚别名：Picrosalvin分子式：C20H26O4

同源盒蛋白HOXA11抗体Bonducellpin C中文名：别名：分子式：C23H32O7