西尼罗病毒PCR检测试剂盒价格

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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
Acridine redN-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色氨酸 97.0%硫酸锌,一 Zn≥ 35.5%

Cresyl Violet acetateFmoc-L-酪氨酸 97%吲哚-3-甲 97%

LumilFmoc-O-苄基-L-酪氨酸 98%氯化锆 ≥99.99% metals basis

Lumil sodium saltFmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸 98%二甲基硅油   用于油浴,180°C

ABTS diammonium saltFmoc-O-叔丁基-D-酪氨酸 99%氧化锌 AR，99%

ABTS substrate liquidFmoc-D-缬氨酸 98%氧化锌 CP，99%

Celestine blue BFMOC-L-氨酸五氟苯酯   98%氧化锌 电子级

HDCBSN-[(9H-芴-9-氧基)羰基]-D-氨酸五氟苯酯  98%氧化锌 99.999% metals basis

AMSFmoc-D-Arg(Pbf)-OH 98%氧化锌 SP

TBHBAN'-(4-甲氧基-2,3,6-三磺酰基)-D-精氨酸 98%氧化锌 99.99% metals basis

NTAN-Fmoc-N'-(均*苯-2-磺酰基)-L-精氨酸  96%氧化锌 分析标准品，络合量：12.280mmol/g

Hematin chlorideFMOC-L-天冬氨酸五氟苯酯  98.5%氧化锌 药典级（Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%）

4-CNL-天门冬二氨酸 98%四丁基氟化铵，三 90%

1-NaphtyolN-Fmoc-N'-三苯甲基-D-天冬酰胺 98%四丁基乙酸铵 97%

2-NaphtholFmoc-L-天冬氨酸-1苄脂 98.5%乙酸钠，三 AR,99%

PyrocatecholN-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸 1-芴甲基酯 98%乙酸钠，三 CP,98%

邻苯二甲酸二甲酯(色谱固定液)JMJD2A (C70G6) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的小鼠抗羊IgG

十二烷基*基氯化铵（DTAC）(99%,离子对色谱级)SWAP70 (D5O6A) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/PE  PE标记的小鼠抗羊IgG

正庚烷(农残级,≥99%(GC))NHERF1 (A310) AntibodyMouse Anti-Goat IgG/HRP  辣根过氧化物酶标记的小鼠抗羊IgG

乙(农残级,≥99.8%)Branched Ubiquitin Antibody Sampler KitMouse Anti-Goat IgG/Gold  胶体金标记的小鼠抗羊IgG

异辛烷(农残级,>99.5%(GC))LRP6 (C47E12) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/FITC  FITC标记的小鼠抗羊IgG

乙胺(色谱固定液,30℃)LRP6 (C47E12) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7标记的小鼠抗羊IgG

甲(for HPLC,≥99.9%)TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的小鼠抗羊IgG

甲(农残级, ≥99.9%)TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy5  Cy5标记的小鼠抗羊IgG

甲(LC-MS,≥99.9%)SHP-2 (D50F2) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Cy3  Cy3标记的小鼠抗羊IgG

二十酸甲酯(分析标准品,≥99.0% (GC))SHP-2 (D50F2) Rabbit mAbMouse Anti-Goat IgG/Bio  生物素标记的小鼠抗羊IgG
西尼罗病毒PCR检测试剂盒价格热休克蛋白受体家族蛋白7B2抗体7-O-Acetylbonducellpin C中文名：别名：分子式：C25H34O8

Heme结合蛋白2抗体Bonducellpin D中文名：别名：分子式：C22H28O7

肝细胞粘附分子2抗体12-Acetoxyabietic acid中文名：别名：分子式：C22H32O4

氨基己糖苷酶D抗体Teuvincene H中文名：别名：分子式：C20H20O6

HHLA2蛋白抗体Triptodiol中文名：别名：Triptonediol分子式：C21H30O4