安氏毛圆线虫PCR检测试剂盒价格

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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
Lipids-Remover from proteins乙酸乙酯 GR,99.5%反二酸 99.5%

Oxyhemoglobin乙酸乙酯  for HPLC, >99.0%(GC)聚烯酸钠 average Mw 500万-700万 ,80目

Prionex乙酸乙酯 ACS, ≥99.5%丁二酸 AR,99.5%

Ub乙酸乙酯 for HPLC, 99.9%丁二酸钠 AR，99.0%

α-Lactalbumin乙酸乙酯 ACS 光谱级, ≥99.5%异辛  >99.0%(GC)

Rifampicin乙酸乙酯 分析标准品，≥99.9% (GC)正壬 GCS, ≥99.5% (GC)

Erythromycin乙酸乙酯 用于蛋白测序分析, ≥99.5%正壬 98%

Bacitracin zinc乙酸乙酯 农残级L-肾上腺素 98%（）

Bacitracin乙酸乙酯 for LC-MS, ≥99.9% (GC)L-去甲肾上腺素 98%

Cytochalasin B乙酸乙酯 用于生物工程, ≥99.9%头孢他定侧链酸 98%

CTX盐酸 AR,36-38%5-苄硫基四氮唑 98.5%

Cephalexin mohydrate过氧化氢溶液(30%) AR5-巯基-1-甲基四唑 98%

Cephalosporin C zinc salt GR,40.0%甲氧基胺盐酸盐 98%

CTC6-溴代己酸 97%叠氮钠 AR,99%（）

Ciprofloxacin hydrochloride4-溴丁酸 98%四氮唑乙酸 98%

Ciprofloxacin4-溴丁酸乙酯 95%油酸 AR

月桂酸甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1131)/Insulin Receptor β (Tyr1146) AntibodyNitrotyrosine  硝基酪氨酸抗体

乙酰乙酸甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1131)/Insulin Receptor β (Tyr1146) AntibodyNIT2  NIT2蛋白抗体

甲基异丁酮(standard for GC, ≥99.5% (GC))Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)NIT1  解酶1抗体

啉(Standard for GC,≥99.5%(GC))Nicastrin (D4F6N) Rabbit mAbNIS  钠转运体蛋白抗体

棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC))Phospho-Insulin Receptor β (Tyr1361) (84B2) Rabbit mAbNIRF/RNF107  环指蛋白107抗体

酸甲酯(Standard for GC,≥99.7%(GC))Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135/1136)/Insulin Receptor β (Tyr1150/1151) (19H7) Rabbit mAbNIR2  膜磷脂转移蛋白1抗体

杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135/1136)/Insulin Receptor β (Tyr1150/1151) (19H7) Rabbit mAbNIR1/RDGBA3  膜相关磷脂转运蛋白抗体

油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC))Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135/1136)/Insulin Receptor β (Tyr1150/1151) (19H7) Rabbit mAbNIPP1/ARD1  核抑制蛋白磷酸酶1抗体

十一酸甲酯(Standard for GCS,≥99.0%(GC))Insulin Receptor β (4B8) Rabbit mAbNIPAL3  NIPA样蛋白3抗体

己酸甲酯(Standard for GC,>99.5%(GC))Insulin Receptor β (4B8) Rabbit mAbNIPAL2  NIPAL2蛋白抗体
安氏毛圆线虫PCR检测试剂盒价格Methyllithium solution通用试剂　100ML

Lithium tri-sec-butylborohydride solut...通用试剂　25ML

Lithium oxide ,≥99.99%通用试剂　25G

Lithium benzoate通用试剂　100G

Lithium cobalt(III) oxide通用试剂　25G

Lithium methoxide,98%通用试剂　25G

Lithium Tetrafluoroborate通用试剂　5G

Lithium acetate通用试剂　100G

sec-Butyllithium solution通用试剂　100ML

Lithium iodide hydrate ,≥99.9%通用试剂　25G

(Trimethylsilyl)methyllithium通用试剂　25ML

Lithium citrate tribasic tetrahydrate通用试剂　100G

Lithium borohydride通用试剂　10G

sec-Butyllithium solution通用试剂　100ML

Lithium iodide hydrate通用试剂　25G