猪葡萄球菌PCR检测试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
8alpha-Hydroxy-alpha-gurjunene3-氯过氧苯甲酸 85%2-溴已酸乙酯　 99%

8alpha-Methacryloyloxybalchanin3-甲基-4-甲酸 99%三氯化金溶液 Au 23.5～23.8%

8-Hydroxy-4-cadinen-3-oneN-甲基乙酰胺 99%2-溴丁酸甲酯  97%

9-Epiblumel B烯苯 98%2-溴已酸甲酯  98%

9-Oxo-2,7-bisaboladien-15-oic acid烯基苯基 97%2-溴酸甲酯  97%

9-Oxo-10,11-dehydroageraphorone2-烯氧基四氢吡喃 98%二氯四氨钯 Pd ≥43.0%

9-Oxoageraphorone2-乙酰芴 98%2-氨基-3-甲基吡啶 95%

9-Oxonerolidol2-氨基芴 98%4-氨基-3-羟基苯甲酸 98%

10(14)-Cadinene-4,5-diol3-乙酰基噻吩 98%4-氨基-3-氟吡啶 97%

11(13)-Dehydroivaxillin2,2'-双噻吩  98%5-溴-2-氯嘧啶 97%

11,13-Dihydroivalin3-丁基噻吩 98%2-氯-6-氟苯胺 98%

11R,12-Dihydroxyspirovetiv-1(10)-en-2-one2-溴-3-己基噻吩 98%5-(三氟甲基)-2-吡啶 97%

11S,12-Dihydroxyspirovetiv-1(10)-en-2-one2-溴-3-十二烷基噻吩 95%2,3,4,5,6-五氟苯基酸 97%

12-Hydroxyisodrimenin三苯基膦醋酸钯 Pd 14.2%硫化铵溶液 AR,20% in H2O

13-Hydroxygermacrone1,4-双(二苯基膦丁烷)二氯化钯 98%氯铂酸 六合物 AR,Pt ≥37.5%

13-O-Acetylcorianin双(乙)氯化钯(II)  Pd 41.0%氯金酸 48～50% Au basis

硬脂酸单甘油酯(>98%,BR)PP2A B Subunit (100C1) Rabbit mAbPhospho-FAK(Tyr576/577)  磷酸化粘着斑激酶抗体

氯化金NUP98 (P671) AntibodyPhospho-FAK(Tyr407)  磷酸化粘着斑激酶抗体

石墨粉(>99%,BR)IQGAP1 Antibodyphospho-FAK(Ser732)  磷酸化粘着斑激酶抗体

硝酸胍(分子生物学级)DRAK2 (33D7) Rabbit mAbphospho-FAK(Ser722)  磷酸化粘着斑激酶抗体

己二(>98%，BR)C/EBPα Antibodyphospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体

六甲基磷酰三胺(>98%,BR)4E-T Antibodyphospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体

还原茚三酮二合物(>98%,BR)Thioredoxin 1 Antibody (Mouse/Rat Preferred)Phospho-FADD(Ser191)  磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体

(>40%,BC)Aven AntibodyPhospho-Ezrin (Tyr353)  磷酸化埃兹蛋白抗体

中粘度羟基纤维素Phospho-DARPP-32 (Thr75) AntibodyPhospho-Ezrin (Thr567)  磷酸化埃兹蛋白抗体

3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)DARPP-32 AntibodyPhospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)  磷酸化雌激素受体α抗体
猪葡萄球菌PCR检测试剂盒规格小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光5克

小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克

小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT5克

小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1公斤

小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。