解没食子酸链球菌PCR检测试剂盒厂家

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Wilfortrine钒粉 99.9% metals basis,100-200 mesh新绿原酸 分析标准品，≥99%

Xanthatin质钒标样 995 - 1005 ug/ml V(3+) 的 2% H3溶液 (20°C)新绿原酸 99%

Xanthinin五二钒 99.99% metals basis（）橄榄苦苷  分析标准品，≥98%(HPLC)

Zederone氧化钇 SP番泻苷C 99%

Zedoarofuran硝酸氧锆 合物 SP亚麻木酚素 分析标准品，≥98%

Zedoarondiol硝酸氧锆 合物 99.99% metals basis雷公藤乙素  分析标准品，≥98%

3,5,9-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one氧化锌 SP牡荆素鼠李糖苷  分析标准品，≥98%

3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene锌粉 SP牡荆素鼠李糖苷  98%

3,5-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one锌粒 SP雷公藤内酯甲  分析标准品，98%

3,7,16-Trihydroxystigmast-5-ene硫代乙酸 98%雷公藤内酯甲  98%

3-beta-Hydroxyergost-5-en-7-one硫代乙酸 95%灿烂甲酚蓝 试剂级

3beta-Hydroxyporiferast-5-en-7-one氨苄青霉素，三 分析标准品羟基萘酚蓝 IND,94%(HPLC)

4-Beta-Hydroxycholesterol苯甲 分析标准品，≥99.9% (GC)羟基萘酚蓝二钠盐 ACS

5,8-Epidioxyergosta-6,9(11),22-trien-3-ol硫酸安普霉素 分析标准品异胺 >99.0%(GC)

6,7-Dihydroneridiene A甲草胺 分析标准品，95.5%二异胺 98%

6beta-Hydroxystigmast-4-en-3-one氟菊酯 分析标准品N-甲基二乙胺 98%

氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Ribosomal Protein L7a (E109) Antibodyphospho-CREB-1(Ser133)  磷酸化CREB-1抗体

氘代苯-D6(0.55ml x 10)Phospho-β-Arrestin 1 (Ser412) (6-24) Mouse mAbphospho-CREB-1(Ser129)  磷酸化CREB-1抗体

氘代苯-D6(10g )Phospho-PDGF Receptor α (Tyr762) (D9B1N) Rabbit mAbphospho-CREB-1(Ser121)  磷酸化CREB-1抗体

氘代苯-D6(10g )Lamin B2 (E1S1Q) Rabbit mAb (HRP Conjugate)phospho-c-Raf(Tyr341)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体

氘代苯-D6(25g)tch2 (8A1) Rabbit mAbphospho-c-Raf(Thr269)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体

氘代苯-D6(50g)tch4 (L5C5) Mouse mAbphospho-c-Raf(Ser494)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体

氘代苯-D6(100g )eIF4A (F52) Antibodyphospho-c-Raf(Ser471)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体

氘氧化钠-d(10g )CD3 (17A2) Rat mAb (APC Conjugate)phospho-c-Raf(Ser462)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体

氘氧化钠-d(50g )PHB1 Antibodyphospho-c-Raf(Ser43)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体

氘代三(0.50 mL x 10 )PHB1 Antibodyphospho-c-Raf(Ser339)  磷酸化原癌基因c-Raf抗体
解没食子酸链球菌PCR检测试剂盒厂家猪促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

猪促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

猪促胃液素受体(GsaR)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

猪单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT5克

猪胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT25克

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