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寄生水霉PCR检测试剂盒价格

寄生水霉PCR检测试剂盒价格

产品简介:寄生水霉PCR检测试剂盒价格
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Amebiasis检测试剂盒根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式

产品型号:50T

浏览次数:17

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 寄生水霉PCR检测试剂盒价格

 英文名称

 Saprolegnia parasiticaPCR

 货号

 LZP7273

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
Ginseside Rb11,2,4-丁三 standard for GC, ≥99.5% (GC)1-溴-2-氯乙烷 98%

Ginseside Rb2乙氧基喹啉 90%1,3-二溴烷 98%

Ginseside Rb3双氯青霉素 分析标准品1,3-二溴烷 99%

Ginseside Rc油桶堆高车1,5-二溴戊烷 98%

Ginseside Rd手动液压搬运车 澳津NP型 载重2T 1220*6801,1,2,2-四溴乙烷 98%

Ginseside Re2-氯吡啶 99%1,2,3-三溴烷 97%

Ginseside Rf环己 99%埃博霉素B  ≥98% (HPLC)

Ginseside Rg12,6-二氯吡啶  97%硫酸长春碱 分析标准品,≥97%(HPLC)

Ginseside Rg22,3-二氯苯甲酸 97%硫酸长春碱 ≥97%(HPLC)

Ginseside Rg32,3-二氯苯甲 98%4,4'-二氨基二苯 分析标准品

Ginseside Rg44-氨基联苯 AR4,4'-二氨基二苯 97%

Ginseside Rg53-氨基-4-羟基吡啶 96%4,4'-二氨基二苯 99%

Ginseside Rg6(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙  99%4,4′-二氨基二苯 Standard for GC,≥99.0% (GC)

Ginseside Rh1(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙 99%酸 97%

20(S)-Ginseside Rh24-(氯甲基)苯甲酰氯 98%酸 分析标准品

Ginseside Rh3三乙基氯硅烷 98%酸钠  97%

2,5-二苯基恶唑(>98%,BC)ANP32A (D7Z5U) Rabbit mAbPhospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197)  磷酸化p21激活激酶1/2抗体

乙酸钠(>98%,BR)Malic Enzyme 2 (E1N3E) XP® Rabbit mAbPhospho-p95/NBS1 (Ser343)  磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体

司班60Malic Enzyme 2 (E1N3E) XP® Rabbit mAbphospho-p95 NBS1(Ser343)  磷酸化滑膜细胞凋亡抑制物1抗体

二氧化钛(>99%,BR)MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)Phospho-p90RSK(Ser380)  磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体

三苯基磷(>98%,BR)Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) XP®Rabbit mAb (PE Conjugate)Phospho-p90RSK (Thr573)  磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体

曲拉通X-405(69.0~71.0%)TFF1/pS2 (D2Y1J) Rabbit mAbPhospho-p90RSK (Thr359/Ser363)  磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体

尿胰蛋白酶抑制剂SPT6 (D6J9H) Rabbit mAbPhospho-p73(Tyr99)  磷酸化P73肿瘤抑制基因抗体

氧化锌(>98%,BC)VCAM-1 (D8U5V) Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor®488 Conjugate)Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389)  磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体

1,6-己二胺(>98%,BR)LAMP1 (D4O1S) Mouse mAbPhospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424)  磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体

2,4-二氯苯氧基乙酸钠(>98%,BR)LAMP1 (D4O1S) Mouse mAbphospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228)  磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体
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检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 



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