羊流产沙门氏菌PCR检测试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
Pyridaben分散黄39 分析标准品正辛酸 AR,99%

ImidaclopridN,N-二甲基对苯二胺 98%正辛酸 ≥98%, FG

TMTDN,N-二甲基对苯二胺 90%正 AR,97%

ESBO2-溴乙胺盐 98%化  AR,≥99.0%

Ruscogenin2-二乙氨基氯乙烷盐酸盐 99%化  GR,≥99.5%(AT)

Sarsasapogenin5-氯杨酸 99%化 ≥99.99% metals basis

Schleicheol 1氯化胆碱 AR，98%化 CP,98.0%

Schleicheol 2氯化胆碱 99%化  ACS, ≥99.0%

Tigogenin二月桂酸二丁基锡 95%化 ≥99.999% metals basis

Sitoindoside I2-二甲氨基氯乙烷盐酸盐 99%化溶液 100g/L

Sitostene二酸二乙酯 99%化钠 AR,99.5%

Beta-Sitosterol二乙氨基乙 99%化钠 99.99% metals basis

Sitosteryl palmitate2,3-二溴丁二酸 98%三氟磺酸 98%

Stellasterol二乙烯三胺五乙酸  CP三氟磺酸 99%

Stigmast-4-ene-3,6-diol二乙烯三胺五乙酸  AR,99.0%三酐 98%

Stigmast-4-ene-3,6-dione盐酸二 99%聚四氟磁力搅拌子 A-507

异烟酸Sec24D (D9M7L) Rabbit mAbPhospho-SRF (Ser103)  磷酸化生长激素释放因子抗体(血清应答因子)

L-苹果酸FRMD6 (D8X3R) Rabbit mAbPhospho-SRC-3 (Thr24)  磷酸化类固受体辅助活化因子-3

蛋白酶K溶液(20 mg/ml)MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Ami-terminal Antigen)phospho-Src(Tyr529)  磷酸化Src原癌基因抗体

多聚赖氨酸0.1%溶液PTPN22 (D6D1H) Rabbit mAbphospho-Src(Tyr418)  磷酸化Src原癌基因抗体

盐酸四环素溶液,50 mg/mlVCAM-1 Antibody (Rodent Specific)phospho-Src(Tyr215)  磷酸化Src原癌基因抗体

8-羟基喹啉硫酸盐(植物细胞培养级)Delta FosB (D3S8R) Rabbit mAbphosphos-PCNA (Tyr211)  磷酸化增殖细胞核抗原抗体

D-葡糖糖-6-磷酸二钠二CBX8 (D2O8C) Rabbit mAbphospho-SOX9(Ser181)  磷酸化转录因子SOX9蛋白抗体

亚硫酸氢钠(AR)Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAbphospho-SNAI2(Ser155+Ser158+Ser160+Tyr164+Tyr169)  磷酸化锌指转录因子Slug抗体

丁二酸钠(AR)Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAbPhospho-SMC1(Ser957)  磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体

氯化铜二(AR)Ret (D3D8R) Rabbit mAbPhospho-SMC1 (Ser360)  磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体
羊流产沙门氏菌PCR检测试剂盒规格兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃100毫升

兔子髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃25毫升

兔子脱氧吡啶/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1米

兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克

兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1米

兔子纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。