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科恩酒曲菌PCR检测试剂盒规格

科恩酒曲菌PCR检测试剂盒规格

产品简介:科恩酒曲菌PCR检测试剂盒规格
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FLU检测试剂盒将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录

产品型号:50T

浏览次数:20

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 科恩酒曲菌PCR检测试剂盒规格

 英文名称

 Rhizopus cohniiPCR

 货号

 LZP7228

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
Procyanidin正 Standard for GC,>99%(GC)1-烷 99%

Grape Seed Extract乙酸正酯 AR,99.0%  CP,95.0%()

Procyanidin B2甲醋酸酯 99% AR,98.0%()

4-Ami-1-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide乙二  99.4%三溴化磷 CP,98.0%

Grease of high temperature III正 CP,98.5% 四 97%

Piperine聚乙烯吡咯烷酮 平均分子量 8000, K16-18酸性品红 高纯级,70%

TBAF三氯乙烯 CP,98.5%考马斯紫R 50%,强度250%

TBAF trihydrate1,2,3,4-四氢萘 CP隐丹参酮 98%

2-Hexane1,2,3,4-四氢萘 AR,97%二氢丹参酮  分析标准品,≥98%

p-Tolualdehyde1,2,3,4-四氢萘 Standard for GC, ≥99.5% (GC)丹参酚酸B 分析标准品,≥98%

cis-Aconitic acid1,2,3,4-四氢萘  >98.5%(GC)丹参酮IIA磺酸钠 分析标准品,≥98%

Sodium dichloroisocyanurate1,2,3,4-四氢萘 分析标准品,≥99.5% (GC)丹参素钠 分析标准品,>98.5%

4-Chloromercuribenzoic acid四 ACS,>99.5% (GC) 丹参素钠 98%

Polyanetholesulfonic acid sodium salt四氯乙烯 CP,97%丹参酮I  分析标准品,≥98%

Ferron硫代乙酸 AR,90.0%丹参酮IIA  分析标准品,≥98%

Talc硫代乙酸 GR,98%丹参酮IIA  98%

放线菌素D(进分)Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Biotinylated)Plexin B2  神经丛蛋白B2抗体

放线菌素DCaspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAbPlexin B1  神经丛蛋白B1抗体

依维菌素Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAbPlexin A2  神经丛蛋白A2抗体

细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)Phospho-Rad50 (Ser635) AntibodyPlexin A1  神经丛蛋白A1抗体

CAPE (咖啡酸苯乙酯)Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Biotinylated)PLEKHM3  血小板白细胞C激酶底物同源结构域M3抗体

磺胺-5-甲氧嘧啶(98%)Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (PE Conjugate)PLEKHM2/SKIP  血小板白细胞C激酶底物同源结构域M2抗体

双甲脒(标准品)SimpleChIP® Chromatin IP BuffersPLEKHM1  石骨症相关蛋白PLEKHM1抗体

双甲脒UBE2C AntibodyPlectin  网蛋白抗体

柠檬酸一Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)Pleckstrin/p47  血小板47蛋白抗体

SalubrinalPerifosinePLDL1/PLCE  磷脂酶C1样蛋白抗体
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检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 



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