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羊血吸虫PCR检测试剂盒厂家

羊血吸虫PCR检测试剂盒厂家

产品简介:羊血吸虫PCR检测试剂盒厂家
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HGV-IgM检测试剂盒以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械

产品型号:50T

浏览次数:29

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 羊血吸虫PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Schistosoma mattheei,PCR

 货号

 LZP7282

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
Ocotillone4-基联苯 97%Ph试纸 1-14

Odoratone频那 99%大口三角烧瓶 500ml

Ohchinin acetate对苯二甲 98%直三口烧瓶 500ml

Ohchinin对苯二甲 CP具塞三角烧瓶 500ml

(Z)-23-Coumaroylhederagenin邻 98%茄型烧瓶 500ml 24口 磨口

Olean-12-ene-3,11-diol亚磷酸三乙酯 98%茄型烧瓶 250ml 24口 磨口

Olean-12-ene-3,11-dioneN-乙基哌 98%短管标准漏斗 40mm

Olean-12-ene-3,24-diol1-乙基哌啶 98%短管标准漏斗 75mm

Olealic acid-3-O-beta-D-glucopyrasyl (1→2)-alpha-L-arabipyrasideN-(2-羟乙基)乙二胺 99%短管标准漏斗 150mm

Olealic acidN-(2-羟乙基)哌 98%茄形烧瓶 100ml/24#

Onjisaponin B高哌 98%直口三角烧瓶 1000ml

Pachymic acid2-甲基哌 98%直三口烧瓶  250ml/24#,24#,24#

Palbine1-甲基哌 99%直三口烧瓶  1000ml/24#,24#,24#

Panaxadiol无哌 99%塑料量杯  5L

Panaxatriol钠 CP,98.0%塑料量杯  2L

Pedunculoside氢化钠 80%洗耳球  90ml

2'-脱氧胞苷-5'-二磷酸三钠盐(分子生物学级)PSD93 (D4Z4D) Rabbit mAbPhospho-NF2(Ser518)  磷酸化2型神经纤维瘤抗体

(>98%,BR)DMAP1 (D4O2G) Rabbit mAbphospho-NF1(Ser2817)  磷酸化1型神经纤维瘤抗体

DMPSimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primersphospho-NF1(Ser2515)  磷酸化1型神经纤维瘤抗体

没食子酸月桂酯(>98.5%,BR)F4/80 (BM8.1) Rat mAb (APC-Cy7® Conjugate)phospho-NEK9(Thr210)  磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK9抗体

dUMP;2'-脱氧尿苷-5'-磷酸二钠盐α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NEDD4L (Ser342)  磷酸化泛素连接酶NEDD4-2抗体

乙胺盐酸盐(>98%,BR)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NDRG1 (Thr346)  磷酸化分化相关基因NDRG1抗体

呋喃三二钠盐ST14/Matriptase AntibodyPhospho-NDRG1 (Ser330)  磷酸化分化相关基因NDRG1抗体

3-吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷(>98%,BR)BST2 (D5V5Z) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Thr219)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体

氧化镧(>99%,EP)Arginase-2 Antibodyphospho-NDEL1(Ser242)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体

氯化镁六(分子生物学)PCSK7 (D4I5G) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Ser231)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体
羊血吸虫PCR检测试剂盒厂家小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

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检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 



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