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马疥螨PCR检测试剂盒规格

产品简介

马疥螨PCR检测试剂盒规格
上海联祖生物相关产品:
VZV-IgG检测试剂盒将推荐的洗涤缓冲液至少0.4 mL注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次

更新时间:2021-03-13
访问次数:281
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 马疥螨PCR检测试剂盒规格

 英文名称

 Sarcoptes scabiei var(equi)PCR

 货号

 LZP7276

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
Hosenkoside A1-丁基-3-甲基咪唑磷酸二丁酯盐 96%溴 CP,98.5%

Hosenkoside B2-溴-3-硝基吡啶 98%溴 ≥99.5%

Hosenkoside C1-丁基-3-甲基咪唑双胺盐 97%邻苯二甲酸二癸酯 90%

Hosenkoside F1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐 95%环氧乙烷 99.5%

Hosenkoside G1-丁基-3-甲基咪唑辛硫酸盐 99%1,8-辛二 98%

Hosenkoside K1-丁基-3-甲基咪唑硫酸盐 95%三乙四胺四盐酸盐 97%

Hosenkoside M5-溴异喹啉 98%环戊酮 GCS,≥99.5% (GC)

Huzhangoside D5-溴-7-氮杂吲哚 98%环戊酮 99.5%

Hyptadienic acidN-(叔丁氧羰基)-1,4-丁二胺 97%环戊酮 CP

ItodiolN-丁基溴化吡啶 99%环戊酮 分析标准品

Inulalide A1-丁基-3-甲基咪唑溴盐 97%2,6-二甲氧基苯酸 98%

Isomangiferolic acid1-丁基-3-甲基咪唑四氟酸盐 97%4-叔丁基苯甲酸 99%

Iso-mogroside V1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐 97%对叔丁基苯甲酸甲酯 99%

Jacoumaric acid1-丁基-3-甲基咪唑氯盐 97%对叔丁苯  95%

Jangomolide1-丁基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸盐 97%苏丹蓝II 高纯级,97%

Japonicones D1-丁基-4-甲基吡啶六氟磷酸盐 99%苏丹蓝II Biological stain

没食子酸甲酯(>98%,BC)ERG (A7L1G) Rabbit mAb (PE Conjugate)phospho-P53(Ser33)  磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体

肌激酶(比活性:>200 U/mg,BC)TKS5 Antibodyphospho-P53(Ser315)  磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体

磷酸酮酸-环己胺盐(>98%,BC)TRPC6 (D3G1Q) Rabbit mAbphospho-P53(Ser20)  磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体

磷酸二酯酶 IIPhospho-CaMKK2 (Ser495) Antibodyphospho-P53(Ser15)  磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体

丁二酰亚胺(>98%,BR)Orexin (D6G9T) Rabbit mAbPhospho-p40phox (Thr154)  磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体

4-联苯单乙酸CaMKK2 (D8D4D) Rabbit mAbphospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38抗体

5-溴尿苷(>99%,BR)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb (Biotinylated)phospho-p23 (Ser113)  磷酸化端粒酶结合蛋白P23抗体

ADA缓冲液二钠盐(>99%,BR)SIX1 (D5S2S) Rabbit mAbphospho-p107/RBL1(Ser975)  磷酸化视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体

无蛋白酶牛血清白蛋白CAR (D3W3G) Rabbit mAbphospho-p107(Thr369)   磷酸化视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体

六氯化铝CD8α (2.43) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjugate)phospho-ODF2(Ser796)  磷酸化尾部结构蛋白抗体
马疥螨PCR检测试剂盒规格小鼠多巴(DA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8°C1克

小鼠多巴D1受体(D1R)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠儿茶(CA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠二氧化酶(DAO)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 

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