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蒙得维的沙门氏菌PCR检测试剂盒价格

蒙得维的沙门氏菌PCR检测试剂盒价格

产品简介:蒙得维的沙门氏菌PCR检测试剂盒价格
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LP Ab-IgA检测试剂盒自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

产品型号:50T

浏览次数:20

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 蒙得维的沙门氏菌PCR检测试剂盒价格

 英文名称

 Salmonella montevideoPCR

 货号

 LZP7261

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
Alisol E 23-acetate杨酸甲酯 CP,98%薯蓣皂素 90%

Alisol F杨酸甲酯 药用级,99%薯蓣皂素 95%

Alisol G杨酸甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)氘代酮 (D,99.8%) + TMS (0.03%)

Alisol K 23-acetate杨酸 AR,99.5%氘代酮 (D,99.9%)

Alisol O杨酸 Ph. Eur., BP, USP, 99.5-100.5%氘代乙 (D,99.96%)

alpha-Amyrin acetate杨酸钠 AR,99.5%乙酸-D4 (D, 99.5%)

alpha-Amyrin杨酸钠 CP,99.5%氘代乙酸 (D,99.93%)

alpha-Amyrin palmitate杨酰胺 99%氘代苯-d6 D,99.6%

alpha-Boswellic acid杨酰胺 USP级氘代苯-d6 D,99.6% (0.03% v/v TMS)

alpha-Hederin杨酰胺 matrix substance for MALDI-MS氘代苯-d6 D,99.96% (0.03% v/v TMS)

alpha-Ocerol苯甲 重蒸馏, ≥99.5%氘代苯-d6 D,99.96%

Alphitolic acidα,α,α-三氯甲苯 99%氘代氯-d (D, 99.8%) +1% V/V TMS

Alstonic acid AN,N-二甲基乙酰胺 or HPLC, ≥99.8% (GC) 氘代氯-d (D, 99.8%) +0.03% V/V TMS

Alstonic acid B二溶液 AR,40 wt. % in H2O氘代氯-d D, 99.8%

Beta-Amyrel acetate二 Standard for GC二氯-d2 D,99.96%

AnemosapogeninN,N-二甲酰胺 GR,99.9%二甲基亚砜-d6 D.99.9%

四乙基氯化铵(>98%,BR)HCN2 (D1C6I) Rabbit mAbPhospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383)  磷酸化肿瘤抑制基因PTEN抗体

吐温60Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAbPhospho-PTEN(Ser380)  磷酸化肿瘤抑制基因PTEN抗体

甲苯噻;赛拉CGRP (D5R8F) Rabbit mAbPhospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240)  磷酸化突触后密度蛋白95抗体

酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)CGRP (D5R8F) Rabbit mAbPhospho-PSD93 (Tyr340)  磷酸化突触后密度蛋白93抗体

3,5-二甲酸(>98%,BR)EphB4 (D1C7N) Rabbit mAbphospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)  磷酸化蛋白酶体PSMβ7抗体

40%乙溶液Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAbPhospho-Progesterone Receptor(Ser190)  磷酸化孕激素受体抗体

硫酸钙(>99%,BR)Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAbphospho-PRL(Ser163)  磷酸化泌乳素抗体

硝酸钴六(>98.0-102.0%,BR)PROX1 (D2J6J) Rabbit mAbphospho-PRKD3(Ser41)  磷酸化蛋白激酶C nu型抗体

二环己基碳二亚胺(>99%,BR)Phospho-CDCP1 (Tyr743) (D2G2J) Rabbit mAbphospho-PRKD1(Tyr463)  磷酸化蛋白激酶C mu型抗体

盐酸镧六(>99%,BR)VPRBP (D5K5V) Rabbit mAbphospho-PRKD1(Ser742)  磷酸化蛋白激酶C mu型抗体
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