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兔粘液瘤病毒PCR检测试剂盒说明书

兔粘液瘤病毒PCR检测试剂盒说明书

产品简介:兔粘液瘤病毒PCR检测试剂盒说明书
上海联祖生物相关产品:
NP检测试剂盒7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。

产品型号:50T

浏览次数:26

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
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组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 兔粘液瘤病毒PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Rabbit Myxomatosis Virus(RMV)PCR

 货号

 LZP7207

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
 Silicic acid乙基三苯基化膦 95%DL-α-酚 分析标准品

Silicotungstic acid hydrate甲基三苯基溴化鏻 98%*基氢醌 98%

Tungstic acid四甲基化铵 98%D-α-酚醋酸酯 96%

2-Butynedioic acid四甲基氢氧化铵 AR,25%溶液L-赖氨酸甲酯盐酸盐 98%

α-Bromoisobutyric acid四丁基氯化铵 离子色谱级, ≥99.0%苯甲 AR,99%

Chrysophanic acid四丁基氯化铵 97%草酸二甲酯 CP,98%

Cinnamic acid四乙基氢氧化铵 AR,25%溶液马来酸二乙酯 96%

Citrazinic acid四乙基氢氧化铵 AR,25%甲溶液1,4-二甲氧基苯 99%

Tricyanic acid三盐酸盐 98%1,4-二甲氧基苯 ≥99%,FCC

1,1-Cyclobutanedicarboxylic acid四丁基氢氧化铵溶液 ~25% in H2O (~0.8 M)间苯二甲 98%

trans-Ferulic acid四丁基氢氧化铵溶液 10% in H2O马来酸二甲酯 98%

Ferulic acid四丁基氢氧化铵溶液 ~25% in methal (~0.8 M)乙酯 AR,99%

Heptadecaic acid四丁基硫酸氢铵 98%苯乙 CP

Heptaic acid四丁基硫酸氢铵 离子对色谱苯乙 GR,99%

Trans-2-Hexeic acid四丁基溴化磷 98%甲氧基乙酸甲酯 99%

Itaconic acid三乙胺盐酸盐 for HPLC, ≥99.0%1-萘甲  98%

纽莫康定B0(肺囊康定) Syk (D3Z1E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)PTP1B  蛋白酪氨酸磷酸酶-1B

福莫特罗 Syk (D3Z1E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)PTP/PTPase/CD148  蛋白酪氨酸磷酸酶CD148抗体

溴甲后马托品p27 Kip1 (D69C12) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)PTOV1  前列腺肿瘤高表达蛋白1抗体

乙酸阿比特龙酯CD13/APN (E1Y7U) Rabbit mAbPTOP  肾上腺皮质发育异常同源蛋白抗体

溴莫尼定 Syk (D3Z1E) XP® Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)PTN/Pleiotrophin  多效生长因子抗体

磺草灵PSMB8/LMP7 (1A5) Mouse mAbPTK9/TWF1  蛋白酪氨酸激酶9抗体

磺草灵(标准品)β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)PTHrP/PTHLH  甲状旁腺激素相关蛋白抗体

苯磺酸贝托司汀MOB1 (E1N9D) Rabbit mAbPTGEs  前列腺素E合成酶抗体

叶绿素铜钠盐GABARAP (E1J4E) Rabbit mAbPTGER1  前列腺素EP1受体抗体

新绿原酸(标准品)Phospho-Progesterone Receptor (Ser294) AntibodyPTEN/MMAC1(NT)  一种肿瘤抑制基因抗体(N端)
兔粘液瘤病毒PCR检测试剂盒说明书人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:1公斤

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